【鱼类专题】夏季高温海鲈结节病——海分枝杆菌在作祟

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夏季高温海鲈结节病——海分枝杆菌在作祟

王林锁、邹元锐

       近年来珠海地区池塘养殖的海鲈在夏季高温时期大面积发生结节病，由于症状与诺卡氏菌引起的内脏结节极为相似，多被诊断为诺卡氏菌病，但大面积暴发流行的水温与诺卡氏菌最适生长水温不相符，所以今年8月和南海所冯娟、徐力文老师海鲈病害团队一起对夏季高温期的海鲈结节病进行调查发现病原是海分枝杆菌。目前关于海分枝杆菌病的报道较少，下面将本次调查的情况做一个分享，希望可以帮助大家及时诊断该疾病。
       一、海分枝杆菌
       海分枝杆菌属于放线菌目、分枝菌科、分枝菌属的非结核（非典型）分枝杆菌。革兰氏阳性，抗酸阳性，生长温度25～35℃，最适生长温度在30～32℃，缓慢生长的光产色菌，即在固体培养基上慢速生长，见光产生橙黄色素。它能感染多种海水及淡水养殖鱼类，导致鱼类结节病。

见光培养后的海分枝杆菌

       二、海鲈海分枝杆菌病的症状及流行
       海鲈长时间感染海分枝杆菌后，病鱼在水面游水，检查体表基本无明显症状，最典型的症状是在肾脏、脾脏及肝脏有白色结节（肉芽肿），肾脏结节数量最多，结节也最大，病变也最为严重，尤其头肾部位最为严重，多数病鱼头肾不断增生扩大，甚至在腹腔增生出肉瘤；脾脏结节数量次之，多数肿大；肝脏出现结节情况比肾脏、脾脏少；部分鱼心脏也会出现增生结节。长期发病鱼鳃丝褪色发白，少数鱼鳃丝也有白色结节。

头肾增生，肾脏、脾脏大量白色结节

头肾在腹腔增生形成肉瘤

       海鲈结节病从4～5月开始出现，7～8月（水温30℃以上）达发病高峰，珠海白蕉地区海鲈池塘从7月开始大面积发病，池塘发病率高达90%。根据8月上旬调查发病主要集中在小规格鱼，规格1～6两/尾发病较多，也较为严重。海鲈结节病属于慢性病，发病池塘每天都有少量死鱼，每天10～40尾不等，严重时100～200尾/天，换水等操作可能会造成死亡增加。病程持续时间长，多数塘从4～5月一直持续到8月仍在继续发病。
       三、海分枝菌病的诊断与治疗
       可根据发病症状及涂片染色快速做出诊断。解剖见内脏有白色结节，取结节内容物或结节内的脓汁做涂片，经瑞士-吉姆萨染色，在100倍镜（油镜）下观察到不着色的杆状细菌可初步诊断。（因为海分枝杆菌的细胞壁含有大量脂质，瑞士-吉姆萨染色时间较短，细菌不易着色。）
       涂片经抗酸染色，在100倍镜（油镜）下观察到红色长杆状抗酸菌，基本可以确诊。（因海分枝杆菌体表面不易着色，但一经着色后，能不被酸性酒精脱色，显微镜观察时保持红色，而其他非抗酸杆菌则被染为蓝色。）

瑞士-吉姆萨染色不着色的杆菌

抗酸染色呈红色杆菌

       细菌分离培养后进行16S rDNA鉴定是海分枝杆菌病诊断的金标准，但由于海分枝杆菌生长对营养要求较高，在水产常用的普通培养基无法生长，且细菌生长缓慢，耗时较久，所以水产上通过细菌分离培养操作诊断较为麻烦。
       本次调查从病鱼的肾脏、脾脏结节中接种细菌于米氏7H10（+OADC）培养基上，在30℃下暗处培养8天，开始长出干燥粗糙、凸起的淡黄色的菌落，曝光48小时后变为黄色或橘黄色菌落，该菌经16S rDNA鉴定为海分枝杆菌。

暗处培养为淡黄色菌落  

曝光后继续培养为黄色菌落

       分枝杆菌属于慢**染，治疗因遵循慢病慢治的原则。用药治疗方案同诺卡氏菌，根据病情严重程度，建议用药至少2个疗程，用药疗程不够即使好转后也容易复发。
       四、注意事项
       海分枝杆菌在自然界中分布广泛，属于机会致病菌。不仅能感染鱼类，形成肉芽肿结构，也能从皮肤伤口处侵入人体四肢末端，导致游泳池肉芽肿病，表现为皮肤病变，形成疣状或溃疡性结节，该病多发于水产从业人员。所以在接触病鱼时，尽量戴手套，避免体表有伤口接触细菌；另外被鱼刺伤后要及时对伤口进行消毒处理。

（转自“利洋水产”微信平台）

利洋小七儿

病鱼症状跟诺卡氏菌易混淆。

素人渔夫

海分枝杆菌和诺卡氏菌为同属细菌，引起的白色结节症状相像。

素人渔夫

海分枝杆菌的培养更困难些，一是对培养基的要求，二是培养的时间也比较长。

hanfj

检测手段的提升助力疾病诊断。

小丑鱼

抗酸染色能够非常清晰的看到细菌形态

jiayanwuu

海分枝杆菌引起的症状和诺卡氏菌相似，诊断时要注意区分