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肠微孢子虫不是导致南美白对虾白便的原因

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发表于 2014-12-10 10:40:29 | 只看该作者 |只看大图 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
肠微孢子虫不是导致南美白对虾白便的原因
Amornrat Tangprasittipap
玛希隆大学,曼谷,泰国

摘要:
背景:对虾肠微孢子虫(ECZ)最早在2009年泰国斑节对虾的养殖中报道,它的自然宿主仍不明确。最近,在泰国南美白对虾养殖中发现了与微孢子虫在形态和组织上极为相似的寄生虫,这时的南美白对虾伴随着白便综合症(WFS)。我们的目标是对新发现的寄生虫和肠微孢子虫(ECZ)进行比较,并研究它与白便(WFS)的因果关系。

结果:对用通用引物进行扩增的核糖体小亚基RNA片段(SSU rRNA)基因进行克隆、测序。分析表明,从南美白对虾WFS池塘发现的新寄生虫与对虾肠微孢子虫(ECZ)有99%的同源性,这表明它们是同一物种。组织学分析用组织切片HE染色发现小管上皮细胞上有极少量的孢子,表明感染的很轻。然而,HE染色组织切片观察结果有一定的欺骗性。由巢式PCR和基于所克隆的SSU rRNA基因片段原位杂交分析知,在肝胰脏没有孢子时发现其小管上皮细胞感染严重。对虾肠微孢子虫(ECZ)患病率高的池塘并没有出现白便(WFS),而一个池塘从WFS中恢复,表明它的感染和WFS之间没有直接的因果关系。通过实验室的口腔攻毒试验验证,发现它可以水平传播给没有感染的虾,但却没有白便的现象。

结论:在南美白对虾中新发现的微孢子虫与斑节对虾中的对虾肠微孢子虫(ECZ)是同种,但它与WFS没有因果关系。然而,这种感染(要远比斑节对虾报道时严重)会延缓南美白对虾的生长,导致生产效益下降,且水平传播会加重损失。因此,建议用PCR和原位杂交技术来识别它的天然宿主,然后将自然寄主从虾养殖系统中剔除。
微孢子虫并不导致白便1.pdf (324.2 KB, 下载次数: 277)
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发表于 2014-12-10 16:26:35 | 只看该作者
明年公司研究所也要重点检测一下这个虫子。
唐绍林
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发表于 2014-12-11 09:20:05 | 只看该作者
研究所表示压力山大,要是有这个虫子的样本就比较好,没有样本,合成引物的时候很麻烦,文献上的引物,太长了,不适合做检测用,而且很多文章上的引物都是经过修改的,即使没有修改,合成回来,也可能扩增不出来。
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发表于 2014-12-11 09:22:18 | 只看该作者
据我们观察白便是目前中国池塘养殖白对虾生长缓慢的原因,肠胞虫不等于白便,因此肠胞虫不是中国目前南美白对虾生长缓慢的原因。这个虫在国内南美白对虾的发病率和危害多大还不清楚。
唐绍林
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发表于 2014-12-11 09:29:17 | 只看该作者
微包子虫在南美白对虾上引起棉花虾,今年也有药店向研究所邮寄了棉花虾检测孢子虫,但是我们没有微孢子虫的特异性检测引物,就只是用检测鲫鱼孢子虫的引物进行了检测,没有检测出来。
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发表于 2014-12-11 09:42:34 | 只看该作者
在人和动物上都有微孢子虫(Enterocytozoon bieneusi)引起慢性腹泻的报道的,这个虫子能不能引起南美白对虾发生白便?值得调查研究。
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发表于 2014-12-11 17:10:10 | 只看该作者
        鉴于利用组织石蜡切片不易将微孢虫(Enterocytozoon hepatopenaei)形成的胞质内包涵体与宿主虾本身固有的结构区分,且不能判断微孢虫感染程度,研究微孢虫最好用PCR或原位杂交方法。

       从文章来看“白便”与微孢虫关系不大;我们研究所一室在观察南美白对虾组织石蜡切片(针对白便)的过程中,也观察到一些类似文章中提到的包涵体结构,如图(深蓝染结构),但似乎包涵体大小上不符合,所以我们更倾向于认为是某种病毒的包涵体。

3-3 肝胰腺-6.jpg (1.33 MB, 下载次数: 193)

南美白对虾肝胰腺组织切片--胞质内深蓝染结构

南美白对虾肝胰腺组织切片--胞质内深蓝染结构

20121111沙北虾17B-3肝胰腺-1.jpg (941.64 KB, 下载次数: 144)

南美白对虾肝胰腺--深蓝染结构

南美白对虾肝胰腺--深蓝染结构
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发表于 2014-12-12 09:54:36 | 只看该作者
以前我一直怀疑楼上病理切片所示包涵体可能是肝胰腺细小病毒(HPV)引起的,但是检测了,没有检测出来。肝胰腺细小病毒引起的是形成细胞核内包涵体,楼上图片看着那包涵体好像是在胞质里面。
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发表于 2014-12-12 18:40:45 来自手机 | 只看该作者
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发表于 2014-12-13 19:18:25 | 只看该作者
鱼饵 发表于 2014-12-12 18:40
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不能只当旁观者啊,留下你的观点和看法,我们都不是专家,但是在一起了,比一定比专家差啊!
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发表于 2014-12-20 15:20:54 | 只看该作者
leikunnuy 发表于 2014-12-13 19:18
不能只当旁观者啊,留下你的观点和看法,我们都不是专家,但是在一起了,比一定比专家差啊!

你是想说三个臭皮匠的故事?
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发表于 2014-12-20 20:55:38 | 只看该作者
虫下 发表于 2014-12-20 15:20
你是想说三个臭皮匠的故事?

猛哥喜欢把自己搞成臭皮匠,那我也没有办法啊!
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发表于 2015-5-7 19:54:28 | 只看该作者
tangsl 发表于 2014-12-10 16:26
明年公司研究所也要重点检测一下这个虫子。

目前我们已经能够检测这种虫子了,已经从海头店和钦州店寄送的样品中检测到,而且已经测序证实了。
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发表于 2015-5-7 22:38:21 | 只看该作者
leikunnuy 发表于 2015-5-7 19:54
目前我们已经能够检测这种虫子了,已经从海头店和钦州店寄送的样品中检测到,而且已经测序证实了。

然后呢?成功的排除了不是白便的主要原因!
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发表于 2015-5-8 08:16:18 | 只看该作者
虫下 发表于 2015-5-7 22:38
然后呢?成功的排除了不是白便的主要原因!

现在是我们能过对其进行检测,建立了针对它的检测方法,有了检测方法,我们下一步就可以对其进行调查。
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