[每周一例]微孢子虫引起梭子蟹“牙膏蟹”

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[病例502]河北省黄骅市南排河某老板有一口梭子蟹和日本对虾混养池塘（图1），80亩，水深2米，没有人工增氧设施。投喂兰蛤，每天一餐，平均每亩20-30公斤，水体略呈绿色，带泥浆色，天津地区2012年7月底至8月初一直连绵阴雨，这时处于养殖中后期，由于底质污染问题，连续出现缺氧。
       2012年8月11日上午，池塘出现死亡梭子蟹，塘头查看为“牙膏蟹”症状。水质检测pH值8.5，氨氮0.2 mg/L，亚硝酸盐 0.05mg/L。水体中大量杂质，少量藻类。
       采集两只“牙膏蟹”解剖观察（图2），鳃丝黄褐色，尖端有黑色斑点，肝胰腺萎缩发白，肌肉白浊、无弹性、呈不透明的乳白色（图3）。肌肉可明显看到一条一条的肌纤维束，界限明显（图4）。镜检病蟹鳃丝有大量可移动的小颗粒物质；步足处淋巴液和胸腔肌肉的印片中可见大量形态较均一、可缓慢转动的小颗粒样的虫体（图5），大小和形态与鳃丝观察到的一致。肌肉组织涂片吉母萨染色后镜检见颗粒状虫体更清晰（图6），虫体大小约1.5-2.0μm×1.5-2.0μm。根据发病蟹症状、虫体特征以及流行特点，参考文献资料初步诊断是微孢子虫引起的发病。
分别从“牙膏蟹”的鳃部、肌肉进行细菌分离培养，取鳃、肌肉组织等用95%酒精保存PCR方法检测病毒，取鳃、肌肉组织用波恩氏液固定做组织病理切片观察。
       结果：白斑综合征病毒阴性，分离出少量细菌，病理组织切片显示肌肉坏死，肌纤维稀疏，肌肉液化（图7）。鳃组织基本正常，鳃小片之间有少许杂质，部分鳃小片萎缩（图8）。
养殖后期梭子蟹死亡量增加，使用含氯消毒剂，加重死亡。最后出塘：公蟹3600斤，母蟹1200斤，车虾（3茬）一共出虾2400斤，总产值25.5万元，总投入52万元，亏损26.5万元。

       分析：1、多年来梭子蟹养殖病害非常严重，其中“牙膏蟹”是重要的病害之一，一般认为是血卵涡鞭虫引起，但是经过多个“牙膏蟹”病例检测，并没有检测到血卵涡鞭虫，而检测到比其更小的（1.5-2.0μm×1.5-2.0μm）虫体，经过参考相关资料（王印庚等，2017）初步诊断是一种微孢子虫。我们观察到的梭子蟹血卵涡鞭虫病主要以肌肉白浊、液化为主（见【每周一例】病例247）。  
       2、“牙膏蟹”病原微孢子虫的生活史和传播途径还不是很清楚，缺少针对病原的有效防控途径。通过流行情况调查发现水质、底质污染严重，经常缺氧的池塘发病率更高，通过改善养殖环境可能是防控“牙膏蟹”的重要途径之一。（利洋公司技术部 杨慧英 利洋水产药店 南排河店 张杰 研究所一室 戚瑞荣 提供 2019.05.30）