[每周一例]池塘养殖黄颡鱼大量死亡，分离出肺炎克雷伯氏菌

利洋服务

[病例616]广东佛山儒溪镇一黄颡鱼精养池塘，面积8.6亩，平均水深2.5米，7台1.5kW叶轮式增氧机，1台1.5kW水车式增氧机（图1）。2021年6月16日放平均规格550尾/斤的黄颡鱼苗36万尾，放苗后一直有零星死鱼，少时每天损耗几尾，多时每天损耗几十尾。截止9月底，平均规格达13尾/斤，增氧机白天开6～7台，晚上全开，一天投喂3餐，共9～10包料。
       9月7日，白撞雨，死鱼10多尾。
       9月8日，白撞雨，死鱼100多尾。
       9月9日，暴雨，死鱼300多尾，鱼吃料变慢，当天投喂3餐，共7～8包料，开始内服阿莫西林等抗菌药。
       9月10-15日，每天死鱼400多尾，内服治疗效果不明显。
       9月16-24日，每天死鱼500多尾，20日开始内服氟苯尼考、盐酸多西环素等，内服后鱼吃料略有好转。
       9月25日，死鱼600多尾，外泼消毒剂，内服硫酸新霉素等。
       9月26-28日，每天死鱼600多尾。
       9月29日，死鱼450尾，上午客户带6尾鱼上店，观察鱼体表黏液多、腹部膨大、肛门发红（图2），鳃丝无明显异常（图3），镜检未发现有寄生虫，解剖见肝脏充血，脾脏肿大发黑，肾脏肿大充血（图4），肠胃充血、出血（图5），部分鱼脑充血（图6）。从6尾鱼的脑、肝脏和肾脏中接种胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）培养皿进行细菌分离培养，并取鳃、肝脏、脾脏、肾脏组织用95%酒精固定保存做病毒检测。下午4：30到池塘服务，观察下风口有大量蓝藻和死鱼，塘边有少量鱼趴边，用快速水质测试盒检测pH值8.2、亚硝酸盐0.6mg/L，氨氮未检出，海控在手测得溶氧5.23mg/L，水温31.5℃。捞取4尾趴边鱼，其体表和解剖症状同上午6尾鱼相似（图7、8），同样方法对其做细菌分离并取样做病毒检测。
       结果：采用实验室普通（RT-）PCR检测方法，对采集的10尾鱼的脑、鳃、肝脏、肾脏组织进行肿大病毒属虹彩病毒（RSIV）、蛙虹彩病毒（LMBV）、弹状病毒（SCRV）、神经坏死病毒（VNNV）检测，结果均为阴性（图9）。经28℃培养24h，10尾鱼有9尾的脑、肝脏和肾脏均分离出细菌（图10、11），该菌落呈圆形光滑、边缘整齐、隆起、灰白色，用接种环挑取菌落时易拉成长丝，革兰氏染色观察为阴性短杆菌（图12），经16S rDNA测序初步鉴定为肺炎克雷伯氏菌（Klebsiella Pneumoniae），药敏试验结果显示该分离菌对“氟多力”敏感（图13）。
       9月30日-10月10日，每天捞鱼300尾左右。

       分析：1、肺炎克雷伯氏菌属于肠杆菌科，广泛存在于人和动物肠道、呼吸道以及水、土壤中，当机体免疫力降低或长期服用抗生素导致菌群失调时易引起发病。文献报道感染该菌引起发病的水生动物有白鲢、鲤鱼、鳗鱼、中华鳖等。
       2、本案例池塘前期有零星损耗，白撞雨后大量死亡，可能是池塘水质变化大诱发发病且发病周期长。从脑、肝脏、肾脏分离出大量细菌，内服多种抗生素均无明显治疗效果，或许和鱼体质较差、治疗药物配伍不合理或剂量不足等有关。（利洋公司研究所一室 雷燕 利洋水产药店 儒溪店 莫福昌、宁科庆 提供 2021.11.4）

tangsl

本病例池塘所在区域多口池塘发病，分离鉴定都是这个菌，这个病在当地局部区域流行。其他黄颡鱼养殖地区也最好分离鉴定一下，看看是不是也有发病。

jiayanwuu

持续死亡的损耗算很大，而且规格不够上市，也没有比较好的处理方式。

利洋小七儿

这种菌好像没有很敏感的药可以用，期待后续方案。

tangsl

从这个塘分离菌做药敏实验似乎可用的抗菌药不多，不过药店自己也从其他塘分离菌做药敏还是有些药物敏感。不同的菌株对药物的敏感性不同，可能与不同池塘以前使用的药物有关。

tangsl

与气单胞菌比较，相同培养温度和时间，菌落更大；做染色看菌体更短和粗。这些特征对临床诊断有很大的参考意义。

leikunnuy

利洋小七儿 发表于 2021-11-5 09:22
这种菌好像没有很敏感的药可以用，期待后续方案。

后来药店技术人员给外泼了两次“新威灭”＋“肤友康“，死亡量下降了。

leikunnuy

tangsl 发表于 2021-11-5 10:48
与气单胞菌比较，相同培养温度和时间，菌落更大；做染色看菌体更短和粗。这些特征对临床诊断有很大的参考意 ...

这个细菌的 菌落很具有自己的特点：菌落呈黏液型（以接种环挑取易拉成长丝且菌落常融合），菌落更大。

leikunnuy

黄颡鱼肺炎克雷伯氏菌不容易处理的另外一个原因就是这个菌就想鮰爱德华氏菌一样能感染黄颡鱼的脑部。

利洋小七儿

leikunnuy 发表于 2021-11-5 11:36
后来药店技术人员给外泼了两次“新威灭”＋“肤友康“，死亡量下降了。

这个配方柔和一点，我看之前草鱼烂鳃也有这么处理的，老配方一样有效。

利洋小七儿

leikunnuy 发表于 2021-11-5 11:41
黄颡鱼肺炎克雷伯氏菌不容易处理的另外一个原因就是这个菌就想鮰爱德华氏菌一样能感染黄颡鱼的脑部。

确实，需要可以穿过血脑屏障的药，像磺胺类，β-内酰胺类，氯霉素类等。

leikunnuy

利洋小七儿 发表于 2021-11-5 14:18
这个配方柔和一点，我看之前草鱼烂鳃也有这么处理的，老配方一样有效。

药店技术人员说，后期就不是肺炎克雷伯氏菌的问题了，主要问题就变成烂鳃的问题了，所以就处理烂鳃了。能控制住死亡。

leikunnuy

利洋小七儿 发表于 2021-11-5 14:26
确实，需要可以穿过血脑屏障的药，像磺胺类，β-内酰胺类，氯霉素类等。

但是做药敏试验的时候，这些药物都不是很敏感，氯霉素好像还是禁药，水产动物上面不能用了。

利洋小七儿

leikunnuy 发表于 2021-11-5 15:37
药店技术人员说，后期就不是肺炎克雷伯氏菌的问题了，主要问题就变成烂鳃的问题了，所以就处理烂鳃了。能 ...

难怪这个配方和处理草鱼烂鳃类似，大黄+季铵盐，原来是这样。

利洋小七儿

leikunnuy 发表于 2021-11-5 15:40
但是做药敏试验的时候，这些药物都不是很敏感，氯霉素好像还是禁药，水产动物上面不能用了。

确实，容易引起贫血，氟苯尼考应该还是可以的。