[每周一例]类立克次氏体和诺卡氏菌混合感染引起杂交鳢慢性死亡

利洋服务 · 发表于 2015-10-29 09:03:09

[病例351] 广东省佛山市勒流镇一杂交鳢养殖池塘，面积8亩，水深2米，3台增氧机（见图1），2014年7月，过塘2-3两的杂交鳢40万尾，9月份分一部分到旁边大塘中，目前该塘有杂交鳢13万尾，规格0.5斤，塘中混养有大头鱼800尾。
   该养殖池塘从9月份分塘后，开始发病，每天死鱼20~30尾，连续持续6个月，到2015年4月，水温上升，死亡量增加，高峰期每天死鱼200尾。养殖户使用多种抗生素均无明显效果，使用底质水质改良剂调水改底后，死亡量下降，但温度上升后，死亡量又会增加。
   2015年4月26日，到该池塘调查，一周前，养殖户用“福地安”改底后死亡量下降，每天20尾左右。测定水质指标：pH值6.5，氨氮0.6mg/L，亚硝酸盐0.8mg/L，水温25℃。池塘中可见少量杂交鳢趴边（见图2），从塘中取出3尾趴边的杂交鳢，外观病鱼腹部膨胀，其它无明显病变（见图3）。解剖病鱼鳃无明显病变（见图4），肝脏和脾脏有大量乳白色结节（见图5、图6），肾脏呈现巨大的“肉瘤” 状乳白色结节（见图7）。从病鱼的肝脏和肾脏中接种TSA培养基进行细菌分离，并取肝脏、脾脏、肾脏分别用95%酒精和波恩氏固定液固定，带回实验室进行病原检测和组织病理切片观察。
   结果：经过25℃，72小时培养，从病鱼的肝脏和肾脏接种TSA培养基均长出大量颗粒状、边缘不规则、隆起、堆叠的菌落（见图8），经鉴定为诺卡氏菌（Nocardia）。应用实验室建立的（RT-）PCR检测方法检测，3尾鱼弹状病毒呈阴性，但类立克次氏体均呈阳性（见图9）。组织病理切片显示病鱼肝脏肝细胞严重水变性、脂肪变性，有脓肿及肉芽肿（见图10）脾脏和肾脏有较多的脓肿或肉芽肿（见图11、图12）。

分析：1、杂交鳢类结节病是养殖杂交鳢暴发性疾病之一，发病鱼以肝脏、脾脏、肾脏等内脏器官出现大量乳白色结节为主要症状，引起杂交鳢类结节病的病原有诺卡氏菌、舒伯特气单胞菌、类立克次氏体和分枝杆菌等。
   2、本病例发病时间长，但整体死亡量不大。从池塘采集病鱼，通过细菌分离培养和病原检测，确定杂交鳢的发病原因是类立克次氏体和诺卡氏菌混合感染。
   3、该养殖池塘的氨氮、亚硝酸盐一直比较高，对鱼体本身抵抗力影响较大，养殖户使用多种抗生素均无明显效果。因此，在处理本病例时，应调控水质，先降低池塘的氨氮和亚硝酸盐，再用药处理。（利洋研究所雷燕戚瑞荣  利洋勒流店刘振技提供 2015.10.29）

leikunnuy · 发表于 2015-10-29 11:36:03

最近市场反应生鱼发病严重，死亡量较大，有需要检测的药店可以采集病料邮寄给我们进行检测，确诊病原。

leikunnuy · 发表于 2015-10-29 11:44:37

目前，我们从杂交鳢、罗非鱼、海鲈上检出有类立克次氏体，河蟹也做了大量检测，但是河蟹未检出。如果有需要进行确诊的，欢迎大家送样。

leikunnuy · 发表于 2015-10-29 15:39:24

对于水产养殖动物，已明确立克次氏体是具有病原学意义的。类立克次氏体为多形性，但主要是球形的革兰氏阴性菌，直径为0.5~1.5μm，专性细胞内增生，在宿主组织细胞有膜结合的胞质空泡内复制。自从鲑鱼立克次氏体（Piscirickettsia salmonis）第一个被确定为鱼类病原以来，已经有十几种经济鱼种感染类立克次氏体导致发病的报道，包括大鳞**哈鱼（Oncorhynchus tshaw ytscha）、大西洋鲑（Salmo salar）、石斑鱼（Epinephelus melanostigma）、罗非鱼（Oreochromis nilotica）、海鲈（Dicentrarchus labrax）、真鲷（Pagrosomus major）、银鲑鱼（Oncorhynchus kisutch）、蓝眼隆头鲶（Panaque suttoni）、虹鳟（Oncorhynchus mykiss）等。2000年，顾志峰等在患“颤抖病”中华绒毛蟹（Eriocheir sinensis）的组织中发现有RLO。2004年，贾伟章等在患结节病的乌鳢（Ophiocephalus argus）中分离出RLO。除此之外，RLO也可感染其他海水和淡水生物，如软壳蛤（Mya arenaria）、紫贻贝（Mytilus edulis）、砗磲（Tridacna gigas）、栉孔扇贝（Chla******rreri）等。由立克次氏体引起的多种经济鱼类和贝类流行性病害，已严重威胁到水产养殖业并已造成巨大的经济损失。