南美白对虾-黄头病毒（Yellow head virus，YHV）

leikunnuy

       黄头病毒（Yellow head virus，YHV）是导致对虾传染性疾病病原之一，急性 感染在2~4天即出现停食等症状，死亡率高，濒死虾头胸部因肝胰腺发黄而变成黄色，故由黄头病毒引起的疾病称为黄头病。我国将其列为二类疫病。

leikunnuy

各位虾药店的兄弟们，今年我们重新设计合成了黄头病毒的检测引物，现在研究所能够准确的对该病毒进行检测了，欢迎各位送检。

leikunnuy

虫下 发表于 2014-2-20 17:23
黄头病毒看来很牛掰的样子，现在随便神马病都能搞空肠空胃了

感觉虾一生病就空肠空胃啊，猛哥如果有发现肝胰腺发黄的对虾，帮忙采点病料啊，这个没有阳性对照，我们只能大海捞针啊！有发现类似上面图的虾，记得采点病料，万分感激啊！

虫下

黄头病毒看来很牛掰的样子，现在随便神马病都能搞空肠空胃了

leikunnuy

黄头病毒感染虾的组织病理学特征是各种组织感染黄头病毒的细胞出现核固缩（pycnotic nuclei）或核崩解（karyorhectic nuclei）。

leikunnuy

上传一张周哥帮忙查的文献中的黄头病毒病虾的照片。2014年，我们共同关注南美白对虾黄头病毒病。

leikunnuy

tangsl 发表于 2013-12-9 20:26
看意思研究所现在可以RT-PCR检测这个病毒了？

已经设计合成了相关的引物了，但是没有阳性对照，我们只能从药店送样的虾样品中，普查，如果出现与引物设计预扩增片段长大小相似的片段，就进行测序，以此来找出阳性病料，再利用阳性病料，对YHV RT-PCR反应体系和程序进行优化，这样之后我们就可以做到对这个病毒的准确检测了。

tangsl

看意思研究所现在可以RT-PCR检测这个病毒了？

leikunnuy

　　　据中科院黄海研究所黄捷老师报告，黄头病毒对南美白对虾的危害很严重，但是公司对这个病毒的检测未足够重视，为了更加准确地调查南美白对虾疾病，为药店提供技术支持，2014年，我们将着重调查和检测南美白对虾的黄头病毒。具体方法就是通过RT-PCR检测和组织病理切片的制备与观察。
　　　恳请各药店在发现如上文所述临床症状发病南美白对虾时，尽快联系研究所（020-61649569、61649570,13556134085），我们将安排人员进行采样调查，谢谢。

leikunnuy

　　　参考文献
　　　[1] 陈爱平.黄头病 Yellow head disease，YHD.中国水产，2011,4,64-65.
　　　[2] 乌日琴，但学明，刘中勇.多重RT-PCR体系检测4种虾病毒的方法.水产学报，2011，35(3)，438-445.

leikunnuy

六、诊断
       1、初步诊断
　　　根据流行病学、临床特征和病理特征做出，确诊须进行实验室诊断。
        2、样品采集
　　　对虾幼体、仔虾取完整个体，幼虾和成虾取虾的头胸部，非对虾的甲壳类动物参照对虾的方法取样，非生物样品取0.1g~0.5g
        3、实验室诊断
　　　3.1组织及病理分析
　　　组织压片的快速染色法：取濒死虾鳃丝或表皮用Meyer’s苏木精-伊红染色， 观察细胞内球形强嗜碱性细胞质包涵体，适用于对虾活体中的黄头病毒检测，但不适于非感染性病毒携带样品的诊断及对宿主进行组织病理学评价。
　　　组织病理学诊断法：H-E染色后观察各种不同组织的病理变化和强嗜碱性细胞质包涵体，本法适用于对虾感染黄头病毒初步诊断或未知疾病样品组织病理学评价，不适于非感染性病毒携带样品的检测。
　　　电镜诊断：可对病虾鳃、淋巴器官等的病毒观察和确诊。
　　　3.2分子检测技术
　　　原位杂交法： 用地高辛标记探针进行， 敏感性比病理组织学诊断法高，适用于黄头病毒敏感宿主的感染程度及病毒扩增状况的评估和疾病确诊。
　　　RT-PCR检测法：通过反转录和聚合酶链式反应，检测特定基因。适用于对虾各个生活期及其他生物或底泥等样品的黄头病毒情况进行定性检测，也适合于病原筛查和疾病确诊。
　　　免疫检测技术：通过制备特异性抗黄头病病毒抗体，用于检测病毒的方法。可取活虾血淋巴，采用免疫印迹试验（WB）、ELISA或免疫荧光等方法鉴定样品是否有黄头病毒感染。从而进行确诊。

leikunnuy

五、致病机制　　　
      黄头病毒攻击的主要目标是虾的头部和胸部。无论是野生虾还是人工养殖虾，一旦染上该病毒，其神经组织就会遭到严重损伤，头部外表颜色会随即呈现黄色，并在两三天内死亡。

leikunnuy

四、病理变化　　　
      黄头病毒主要侵染外胚层和中胚层起源的组织器官，可感染血淋巴、造血组织、鳃瓣、皮下结缔组织、肠、触角腺、生殖腺、神经束、神经节等，并致全身性细胞坏死。组织压片可观察到中度到大量球形强嗜碱性细胞质包涵体；血淋巴涂片可观察到中度到大量血细胞发生核固缩和破裂；组织切片可观察到坏死区域有球形强嗜碱性细胞质包涵体，直径为2um或稍小，胃皮下组织和鳃是观察特征性包涵体的最佳部位。

leikunnuy

三、临床症状
      患病虾有一个吃食量增大然后突然停止的过程，一般2~4天内出现头胸部发黄和全身发白，肝胰腺变软并由褐色变为黄色。许多濒死虾聚集在池塘角落的睡眠，同时引起对虾迅速大量死亡。

leikunnuy

二、流行病学　　　
         黄头病于1990年首次在泰国东、中部养殖斑节对虾中发现，目前已报道疫情的国家或地区有中国大陆、中国台北、印度、印度尼西亚、马来西亚、菲律宾和越南。
　　　有实验表明，YHV可引起斑节对虾、南美白对虾、细角对虾、棕虾等大量死亡。
　　　YHV主要通过水平传播，鸟类也是传播媒介之一。
　　　YHV严重影响养殖期为50~70天对虾，感染后3~5天内发病率高达100%，死亡率达80%-90%。