细菌分离不出来的原因

leikunnuy

最近有药店兄弟询问，发病鱼看着是细菌病的症状，但是做细菌分离培养却分离不出细菌，是怎么回事？在这里简单给大家分析一下分离不出细菌的几点原因：
1、样本（病鱼）本身无菌。看着像是细菌病症状，但是有可能是其它病原引起的。
2、培养皿过期失效或者选择的培养皿营养不足。目前研究所提供的一次性培养皿保质期为一个月，大家尽量在有效期内使用；在做细菌分离时，选择合适的培养皿，比如在进行链球菌分离时选择营养比较高的BHIA（脑心浸液琼脂培养基）
3、培养温度不合适。常见水产动物细菌的培养温度为28℃，高于或低于这个培养温度细菌就可能长不出（特殊细菌除外，如诺卡氏菌、杀鲑气单胞菌需要在25℃培养）。
4、培养时间不足。常见细菌的培养时间一般为16~24小时（个别细菌培养时间需要72小时甚至更长时间，如鮰爱德华氏菌、诺卡氏菌）。
5、细菌接种时，接种针未冷却，细菌被烫死了。接种时，接种针在火焰上灼烧之后，冷却之后再进行细菌分离培养。
6、细菌接种时，接种针未接触到组织。在细菌分离时，保证接种针接触到组织，可以先用小剪刀将组织剪开一个小口。
7、病鱼本身投喂过大量抗生素。病鱼本身投喂过大量抗生素后、体内的细菌处于抑制状态，细菌少，分离不出细菌。

沙湖双黄蛋

有些时候放冰箱里拿出来，接种时没注意，放置的时候汽水多了，也培不出来

素人渔夫

沙湖双黄蛋 发表于 2022-3-19 08:24
有些时候放冰箱里拿出来，接种时没注意，放置的时候汽水多了，也培不出来

严格一点就是要用密封带，记得倒置

leikunnuy

沙湖双黄蛋 发表于 2022-3-19 08:24
有些时候放冰箱里拿出来，接种时没注意，放置的时候汽水多了，也培不出来

我一直给药店的建议是培养皿不要放4℃冰箱，直接放在阴凉干燥的地方，放在冰箱里面会有很多水气的，很容易污染。我把我的建议给**OSS说了，**OSS没有通过，所以我只能私下给药店建议。

leikunnuy

素人渔夫 发表于 2022-3-19 17:35
严格一点就是要用密封带，记得倒置

倒置培养很重要，这是细菌分离培养 的基本要求，但是还是有很多忘记倒置培养。倒置培养的目的是为了细菌能够更好地利用培养皿中的营养物质。

素人渔夫

leikunnuy 发表于 2022-3-19 22:01
倒置培养很重要，这是细菌分离培养 的基本要求，但是还是有很多忘记倒置培养。倒置培养的目的是为了细菌 ...

也能减少水汽的影响

leikunnuy

素人渔夫 发表于 2022-3-21 17:01
也能减少水汽的影响

培养皿里面有水汽是不正常的，我一直给药店说培养皿不要放冰箱，放冰箱就会有水汽，那样很容易污染，姐的细菌也会随着水灾培养皿上搞的到处都是。

沙湖双黄蛋

店面以前没有空调的时候 店里夏天哪里不是高温？特别是有些时候要带下去 所以潜意识觉得放冰箱会好点

leikunnuy

沙湖双黄蛋 发表于 2022-3-27 19:46
店面以前没有空调的时候 店里夏天哪里不是高温？特别是有些时候要带下去 所以潜意识觉得放冰箱会好点

关键是放冰箱里面拿出来之后里面会有很多水气的，很容易污染啊，邮寄回来的培养皿那就更没法看。现在多数药店还是有空调了，可以放在阴凉干燥的地方就行，放两个月都没有问题，我自己也在实验室做过这方面的实验的。