[每周一例]笋壳鱼鱼苗发生神经坏死病毒病

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[病例425]广东顺德勒流镇冲鹤村一笋壳鱼养殖池塘，面积2亩，水深1.7米（图1）。2017年5月25日放规格为3cm/尾的杂交笋壳鱼鱼苗2.3万尾，投喂冰冻丰年虫、水蚯蚓和冰鲜鱼。放苗时水温约27℃，放苗后当天和次日每天都有几尾笋壳鱼苗体色发黑（“黑身”）、上浮、水面下停止不动（“定身”），有的鱼苗腹部朝上“假死”（俗称“翻白肚”）（图2、3），人靠近惊动立刻螺旋状游动离开，人离开以后又上浮，偶尔见个别鱼苗在水面打转。
       5月27日下大雨后晴天，“黑身”、上浮的鱼苗增多，约几十尾。
       5月28日外泼聚维酮碘，上浮鱼苗增加到100多尾。
       5月30日又外泼聚维酮碘，上浮鱼苗继续增加，死亡后沉底，具体数量不好统计。
进入6月份以后停止外用消毒剂，以调水、增氧为主，死亡量逐渐下降，连续晴天时基本不再死亡。
       6月下旬连续阴雨，水中有较多蓝藻，水温约29～30℃，又开始有鱼苗“黑身”、上浮。
       6月24日上浮、死亡10多尾，外泼聚维酮碘。
       6月25日上浮、死亡30多尾。
       6月26日外泼聚维酮碘，死亡增加到100多尾。
       6月27日上浮、死亡200多尾。取上浮的发病鱼，现场接种肝脏、脑用营养琼脂培养基进行细菌分离培养，取整尾发病鱼分别用95%酒精和波恩氏液固定送公司研究所分别做病毒的PCR检测和组织病理切片观察。
       结果：在28℃经24小时培养，发病鱼肝脏中未分理出细菌。病鱼的眼和脑部神经坏死病毒（ Nervous necrosis viral,NNV）呈阳性（图4，条带5、6）,病理组织切片观察见发病鱼脑组织和眼组织个别细胞坏死，严重的细胞坏死严重，组织空泡化（图5），具有神经坏死病毒病的典型病理变化。用NNV阳性鱼脑组织匀浆后组织液接种SSN-1细胞，120h后细胞发生CPE（细胞病变效应），表现为细胞质空泡化，细胞溶解和脱落（图6）。
       由于蓝藻暴发，水质恶化，7月初开始换水，并重新培水。随着水质改善和水温也逐渐升高，死亡量逐渐下降。

       分析：1、本病例根据发病鱼的临床症状、流行特点和实验室检测结果，初步诊断笋壳鱼鱼苗发病是由神经坏死病毒病引起的。神经坏死病毒病是海水养殖鱼类鱼苗、鱼种阶段的重要疾病，多数海水养殖鱼类都有发病，但是淡水鱼类该病鲜有报道，仅见淡水中的欧洲鳗、鲶、鲟和尼罗罗非鱼发生该病的报道，笋壳鱼的神经坏死病毒病尚未见报道。
       2、本地区笋壳鱼的神经坏死病毒传播方式等流行病学资料尚不清楚，下雨后发病，发病后外用消毒剂死亡量增加，改善水质环境死亡量会明显下降。（利洋公司技术部唐绍林 研究所一室张会军、戚瑞荣、张东霞 提供2017.08.24）

tangsl

海水鱼的疾病，现在在淡水养殖种类上流行，值得关注。据调查该病近几年每年都有造成笋壳鱼放苗后7天内死亡100%的案例。有些池塘的感染途径已经明确，流行病学病因目前调查的也比较清晰，为这个病的防控，提供了一定依据。对这个病的防控建议以后写出来，贴出来。目前水温上升到30度以上，这个病几乎没有了。

tangsl

这是一个单纯NNV感染的案例，外用消毒剂无效，死亡反而因为刺激会增加。本病例发病的一个重要因素是水质恶化，调水有效降低死亡。争取下周每周一例发一个笋壳鱼NNVD以后继发细菌感染的病例，用药物有效降低死亡，具体症状和方法敬请期待。

tangsl

有些人看不懂这个病例：
1、体色发黑（“黑身”）、上浮、水面下停止不动（“定身”），有的鱼苗腹部朝上“假死”（俗称“翻白肚”），人靠近惊动立刻螺旋状游动离开，人离开以后又上浮，偶尔见个别鱼苗在水面打转。以上症状都是海水鱼苗NNVD的症状和流行特点（鱼苗阶段），这个案例的笋壳鱼出现了这个症状和流行特点，所以从临床症状上怀疑有NNV感染的可能，之后进行了3个方面的实验室诊断。
2、病毒的PCR检测NNV呈阳性，说明鱼体内（眼、脑，是NNV的靶器官）有NNV的特异性基因片段，我们也请深圳动检做了检测，结果相同。
3、病理组织切片观察见发病鱼脑组织和眼组织个别细胞坏死，严重的细胞坏死严重，组织空泡化，具有神经坏死病毒病的典型病理变化。
4、用NNV阳性鱼脑组织匀浆后组织液接种SSN-1细胞，120h后细胞发生CPE（细胞病变效应），表现为细胞质空泡化，细胞溶解和脱落。说明这个病毒在这个细胞上可以生长繁殖（复制），并对细胞产生损害。
      因此在临床上，就可以诊断该病例是NNV感染引起。同时病例也告诉我们这个病的处理方法可以借鉴。