[每周一例]冬棚养殖罗氏沼虾分离出霍乱弧菌

利洋服务

[病例443]广东省中山市阜沙镇梁老板，有一个罗氏沼虾与南美白对虾的冬棚混养池塘，面积8亩，平均水深1.4米，4台1.5kW的叶轮式增氧机，1台水车式增氧机（见图1）。2017年10月20日搭建冬棚，10月27日放南美白对虾苗30万尾，11月11日，从邻近母塘过塘800多斤罗氏沼虾，平均规格83尾/斤。现每天投喂2餐，20斤/餐，罗氏沼虾规格40尾/斤。
       过塘后发现有罗氏沼虾趴边，吃料变差，少量浮上水面死亡，每天死亡10余尾，早晨死亡及蜕壳后死亡的情况居多，这种情况持续已将近2个月，混养的南美白对虾没有异常。平时主要以解毒、稳水、改底及EM菌调水措施为主，每月用碘消毒一次，效果均不佳。
       12月26日，晴，死亡30多尾，水色青绿色，以蓝藻、绿藻为主，外泼“活力钙”、“营养快线”，各2亩/包。
       12月27日，晴，死亡30多尾，外泼“速解安”2亩/包，干撒“底加氧”4亩/包，水色无变化。
       12月28日-1月4日，一直晴天，伴有东风或东南风，每天死亡10余尾，期间有再次外泼“活力钙”、“营养快线”、“速解安”、“底加氧”，水色稍有变化，水体清爽。
       2018年1月5日，上午10点到现场，测定水体pH值8.5，氨氮与亚硝酸盐测不出，水温25℃。塘边有虾趴边（见图2），捞出趴边虾，身体微微发黄，断须、断足居多，足尖发黑（见图3），有的软壳，剖解头胸部透明胶状物增多，肠道无食物。取10尾虾（1尾未发病）的肝胰腺接种普通营养琼脂培养基，做细菌分离培养，并取鳃、肌肉和肝胰腺用95%的酒精固定做病毒检测，另取鳃、肠和肝胰腺用波恩氏液固定，做组织病理切片观察。
       1月8日，泼“永乐碘”2亩/瓶，“出败康”1亩/包，隔天同剂量再使用一次，处理后死亡稍有减少。后期陆续仍有死亡，死亡量与前期变化不大。
       结果显示，10尾罗氏沼虾中有8尾虾的肝胰腺培养出大量细菌，其中2尾虾的肝胰腺培养出两种菌落，一种在普通营养琼脂培养基上呈圆形、光滑、透明菌落（A菌落）,一种是圆形、光滑、黄色菌落（B菌落）（详见图4）。另外6尾虾的肝胰腺分离出的菌落以A菌落为主，未发病的虾分离出少量A菌落，A菌落经16SrDNA测序鉴定为霍乱弧菌；PCR检测白斑症病毒（WSSV）、诺达病毒（MrNV）均呈阴性（见图5）；组织病理切片观察，对比正常样品，发病样品的肝胰腺腺管间多小的坏死灶，鳃组织肿胀、多小的坏死灶，个别虾肠腔内可见虾肝肠胞虫（见图6）。

       分析：1、霍乱弧菌是鱼、蛙、甲鱼、虾、蟹、贝等水生动物的致病菌（郑国兴1986，王立平等1987），尚未见霍乱弧菌引起罗氏沼虾发病的报道，本病例中，从发病罗氏沼虾的肝胰腺能分离出大量的霍乱弧菌，但是否由霍乱弧菌感染引起发病，还需进一步的调查。
       2、本病例中，过塘后罗氏沼虾开始出现趴边、死亡现象，同池塘中南美白对虾未出现异常情况，可能与拉网操作应激，罗氏沼虾体质下降，继发感染细菌有关。（利洋公司技术部 肖艳翼 利洋水产药店阜沙店 黄一明 利洋水产研究所张文文 戚瑞荣 王娟 提供 2018.03.15）

tangsl

罗虾拉网后死亡，习惯上叫拉网综合征，我理解说不明白的都叫了综合征。江苏也叫“滴星”。这个病例的亮点是从病虾体内分离到大量的霍乱弧菌。霍乱弧菌是否是这个病的病原，我主观上认为是，但还没有证实，我们没有精力做攻毒实验，进一步的工作不是我们的工作重点。