弧菌、白便、微孢子虫三者到底什么关系

小丑鱼

这份报告有点“料”：弧菌、白便、微孢子虫三者到底什么关系，真相是……

中国水产第一媒体  水产前沿
白便和EHP到底有什么关系？
来源：GAA
作者：L******nando Aranguren，Ph.D等

来自拉丁美洲国家的南美白对虾出现白便的症状

        白便综合征（WFS）是指在东南亚地区养殖的南美白对虾或斑节对虾的池塘中出现漂浮的白色粪便。该综合征被发现与一些若干问题有关，包括虾生长迟缓、大小差异、投料减少和慢性死亡。

       在已报告有白便综合征的国家，也报告了其他影响虾肝胰腺和肠道的病原体，这些病原体包括微孢子虫（EHP），引起急性肝胰腺坏死的副溶血性弧菌（VpAHPND）和由弧菌引起的脓毒性肝胰脏坏死（SHPN）。图1显示了报告出现白便综合征和其他肠道疾病的东南亚国家。

图1：东南亚出现肠道类疾病的国家分布

       EHP是一种细胞内微孢子虫，在肝胰腺中受影响的小管上皮细胞的细胞质内复制，是一种新兴的病原体，主要影响东南亚几个国家养殖的南美白对虾，包括印度尼西亚、越南、中国、泰国、印度和马来西亚。EHP感染的虾的主要临床症状是生长迟缓，导致大小的变异性增加。在更高级阶段，受EHP感染的虾通常表现出软壳、“嗜睡”，减少采食量和空肠。

       一些出版物将白便综合征的原因归因于不同的病因，包括霍乱弧菌、Bacilloplasma sp.和Phascolarctobacterium sp.。还有人提出EHP不是白便综合征的致病因子。基于与白便综合征相关的这些差异，我们进行了一项系统研究，以确定世界上报告EHP的两个不同地区的白便综合征与肠道病原体（包括EHP）之间的任何潜在关系。

       这项工作的第一部分是在一个有EHP和白便综合征历史的亚洲国家进行的。从养成池塘收集样品：一个池塘的虾显示有白便综合征，另一个没有，再通过收集肝胰腺和粪便样品并通过组织学和PCR分析他们之间的关联性。

图2：显示有白便综合征的虾的样品（左上）;观察到胃肠道移出来后有白色的色变（右）；肝胰腺显示出受影响的肝胰管的严重畸形和黑化以及缺乏R细胞（左下）

        通过定量PCR（qPCR）分别分析来自每个生长池的虾的肝胰脏组织。图3显示了经历白便综合征与没有白便综合征的池塘动物的EHP负荷结果。循环阈值（Ct）值越低，样本中的EHP负载越高。

图3：显示WFS（N=10）的虾中EHP的实时PCR与不显示WFS症状的虾（N=10）

       两组动物之间的EHP拷贝数存在明显差异。白便综合征组的平均拷贝数为每ulDNA4×10 7 拷贝，而没有白便综合征的池中每ulDNA1×10 5 拷贝，差异超过2个对数。这表明，与没有白便综合征的虾相比，具有白便综合征的虾可能具有更高的EHP传染性。同一虾的粪便上的qPCR检测显示出相似的结果，即：有白便综合征的虾在粪便中的EHP拷贝数高于没有白便综合征的虾。

       后来，在同一个EHP流行区，我们确定了具有三种不同历史的池塘样本中的EHP拷贝数：没有白便综合征历史的池塘、显示白便综合征的池塘和有白便综合征历史的池塘。图4显示了来自三个不同池塘的动物的EHP拷贝数。

图4：绿色为源自没有WFS病史的池塘、红色为经历WFS的池塘和橙色为具有WFS病史的池塘的虾肝胰腺组织中的EHP拷贝数

       我们再次发现与第一个实验中获得的结果相似的结果。来自经历白便综合征（约1×10 7 拷贝）的池塘的虾的EHP拷贝数更高，其次是具有白便综合征历史的池塘（约4×10 4 拷贝）和没有白便综合征的池塘。

白便综合征在美洲

       在西半球，2016年我们报告养殖虾中存在EHP和EHP样病原体。受EHP感染的虾表现出与东南亚国家相似的临床症状，包括喂料减少，生长严重迟缓和体重差异。两年后，我们在我们之前报道在拉丁美洲养殖的EHP感染的南美白对虾的地区描述了白便综合征的第一例病例。

图5：拉丁美洲经历白便综合征的南美白对虾中的EHP的确认

SHPN在白便综合征中的作用

       在报告有白便综合征的东南亚和拉丁美洲，EHP并不是与白便综合征相关的唯一病原体。H＆E染色分析的虾除了EHP外，还显示了脓毒性肝胰脏坏死或SHPN的病变（图6）。

图6：来自经历白便综合征的池塘的南美白对虾（10X）的肝胰腺中，败血症性肝胰腺坏死（SHPN）的病变实例

       SHPN是一种主要由弧菌属（Vibriospp.）引起的细菌性疾病，包括致病性还有机会性弧菌属（Vibriospp.）。机会性弧菌总是存在肝胰腺中，然而，当原发性肠道病原体引起肝胰腺病变时，这些机会性弧菌属得到一个入口，以在受影响的肝胰腺定植并引起SHPN。

图7：原发性肠道病原体，机会性弧菌属和可能未知的环境因子的组合可导致EHP流行区域的白便综合征

       如图7所示，根据我们的分析，我们发现白便综合征、EHP和SHPN在养成池中存在关联，这表明白便综合征是受肠道病原体和可能未知环境因子（一个或多个）影响的虾的一种可能的生理反应。

       西半球养殖虾中白便综合征的发现很重要，因为它可以用作EHP存在的预测因子。此外，它将有助于阐明EHP与白便综合征发生之间的强烈关联。由于早期EHP感染没有明显的临床症状，因此应密切监测该区域内养殖的虾是否存在EHP和白便。

展望

       根据我们的研究，白便综合征（WFS）与EHP流行区域的EHP之间存在密切关联。EHP与其他肠道病原体（包括SHPN）和可能的未知因素相结合可引起白便综合征。

       在EHP流行地区，显示白便综合征临床症状的虾表明在养成池塘中有非常活跃的EHP感染过程。美洲虾业的白便综合征可能反映了15年前东南亚发生的情况，其中EHP偶尔发生，但现在已成为该地区虾业的主要卫生风险因素之一。必须制定生物安全战略，以尽量减少美洲EHP病原体传播的风险。

文章转自水产前沿微信公众平台

tangsl

      最初一个泰国的研究者发文认为微孢子虫是白便的致病原因，后来这个研究者又自己否定了自己的观点。这篇文章又进一步研究、分析了微孢子虫和白便的关系，认为二者有密切的相关性。
      其实用流行病学的知识和思维方法，就很容易理清他们之间的关系，微孢子虫只是这个白便的重要诱发因素，在流行病学上也叫流行病学病因，而弧菌是这个病的病原学病因（流行病学上也叫必需病因，意思是没它不行，没它发不了病。本文没有完全肯定弧菌是病因，但是我们从临床上看是细菌引起的，细菌是这个病的病原，没它不行，因为几乎所有病例都是内服或外用抗菌药物有效，说明细菌参与了所有白便的病例，这是确定必须病因也就是病原的重要流行病学思维方法。我们公司研究所和技术部以前做了无数次的细菌分离，苦苦追寻白便的病因，其实当时就是为了验证弧菌这个病原，但是很多病虾我们没有分离到细菌，现在看是方法的问题，我们接着肝脏的组织是有限的，细菌不是布满整个肝脏，我们也多数情况下没有接种肠道）。当然，从我们现在对白便的了解，白便不是一因一果，是多因一果，因为几乎所有白便都有诱发因素。
      以前有人认为白便的原因是蓝藻暴发，在流行病学上没有错，蓝藻是另一个诱发因素（流行病学病因）；我们观察到其它重要的诱因还有缺氧、水变、底臭、饲料发霉或酸败、长时间阴雨、长时间高温等等。虽然病原（传染病）是内因，但实际现场处理问题和预防疾病很多情况下无法针对病原，而通过预防诱发因素更有效，白便就是如此，这就是抓主要矛盾，而不是抓内因（流行病学重视主要矛盾，流行病学是解决实际问题的应用学科），病毒病（没有疫苗有效预防）、小瓜虫（没有有效药物治疗）、找不到病原学病因的疾病都是如此。知道这些对在现场如何解决实际问题的思路和方法非常有意义。

tangsl

这篇近期的外文研究报告的中心内容就是：1、微孢子虫（肝肠胞虫）是白便的重要诱因；2、曾经发生过肠肝胞虫的池塘，再来养虾，虾体内的肝肠胞虫的数量比没发生过的多很多。3、有肝肠胞虫的损伤，弧菌就更容易借机（机会致病菌）感染，发生白便。
我觉得这篇文章对我们进一步认识微孢子虫（肝肠胞虫）的危害和白便的产生原因有重要意义。

天天狸

白便感觉是慢性病，弧菌感染发病是比较快的，所以弧菌应该不是导致白便的直接原因

会隐身的猫

看完觉得有点像对虾肠肝孢子虫破坏组织细胞后，继发的多种弧菌复合感染，别刺激、营养足。

会隐身的猫

有专家讲过弧菌不一定是病因，但很有可能是重要帮凶，还是要定期优肽控制一下，尤其阴转晴的时候。

素人渔夫

高温期，对虾摄食量增加，池塘物质循环代谢加快、环境恶化，病原（虾肝肠胞虫或其它肠道病原体）或环境因素（如各种毒素）等损伤对虾肝胰脏，病原菌趁机感染，加重病情进一步恶化，出现白便症。感觉诱发因素、病原菌更像是白便症的必要不充分条件。

丁玉龙

会隐身的猫 发表于 2019-6-17 18:53
有专家讲过弧菌不一定是病因，但很有可能是重要帮凶，还是要定期优肽控制一下，尤其阴转晴的时候。

有时候很难说清楚因果关系，有时候是弧菌导致发病，有时候可能是发病虚弱之后导致容易感染弧菌，所以发病和弧菌经常相伴随，但也不好说清楚。

丁玉龙

素人渔夫 发表于 2019-6-27 11:09
高温期，对虾摄食量增加，池塘物质循环代谢加快、环境恶化，病原（虾肝肠胞虫或其它肠道病原体）或环境因素 ...

说的很对，弧菌有时候是发病原因，有时候是帮凶，趁机感染，加重病害。

tangsl

今年大家都反应白便特别严重。为啥高温季节，池塘今天缺氧，明天肯定白便？今天藻类大量死亡，明天也肯定白便？