【技术分享】常见水产动物致病菌的初步分离鉴定

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常见水产动物致病菌的初步分离鉴定

区燕云

     水产动物细菌病多种多样，不同致病菌所致症状有所不同，发病后敏感的治疗药物选择也因菌而异，所以发病后初步判断致病菌种类对养殖疾病的认识和防控具有重要意义。然而实践过程中，多数养殖朋友和技术服务人员对致病菌的认识仍存在一定的局限，不能正确诊断病因，因此耽误最佳治疗时机。
     对此，笔者结合实践及多年的实验室诊断经验，总结水产养殖动物常见致病菌在培养基上的菌落形态特征、革兰氏染色特性、培养时间等，帮助大家快速初步判断分离出的致病菌种类，以便及时精准用药，减少损耗。
       一、气单胞菌
       （1）菌落形态
       在TSA培养基29℃培养18小时可以看到很明显的菌落，呈淡黄色，隆起，馒头状。常见有嗜水气单胞菌、维氏气单胞菌、舒伯特气单胞菌。舒伯特气单胞菌需培养24小时以上能看到呈半透明、灰白色小菌落。舒伯特气单胞菌在杂交鳢（生鱼）上常见。嗜水气单胞菌、维氏气单胞菌在淡水鱼类都比较常见。

嗜水气单胞菌培养18h菌落形态

维氏气单胞菌培养18h菌落形态

舒伯特气单胞菌培养24h菌落形态

      （2）革兰氏染色形态
     革兰氏染色阴性，短杆状，散在排列，无芽孢。

嗜水气单胞菌革兰氏染色形态

       二、爱德华氏菌
       （1）菌落形态
       爱德华氏菌一般在TSA培养基29℃培养18～42小时，呈半透明，湿润，灰白色菌落。迟缓爱德华培养18小时肉眼能看见针尖状半透明小菌落。鮰爱德华氏菌需要培养42小时才能看见半透明小菌落。

迟缓爱德华氏菌培养24h菌落形态

鮰爱德华氏菌培养42h菌落形态

       （2）革兰氏染色形态
       革兰氏染色阴性，短杆状，散在排列，无芽孢。迟缓爱德华染色呈小短杆状，鮰爱德华氏菌呈细杆状，有些会呈长丝杆状。两者长短区别明显。

迟缓爱德华氏菌革兰氏染色形态

鮰爱德华氏菌革兰氏染色形态

       三、弧菌
       （1）菌落形态
       在TCBS培养基29℃培养18小时，呈绿色、黄色、黄绿色菌落。在TSA上多数呈半透明、湿润、圆形的菌落。

副溶血弧菌菌落形态（左）哈维氏弧菌（亮黄色）菌落形态（右）

溶藻弧菌菌落形态（由黄色渐变成绿色）（左）霍乱弧菌菌落形态（右）

创伤弧菌菌落形态（TCBS上呈绿色）

拟态弧菌菌落形态（TCBS呈绿色）

       （2）革兰氏染色形态
       革兰氏染色阴性，短杆状，一般有直杆和弯曲的形态。无芽孢。弧菌革兰氏染色在不同的生长条件形态不同。弯曲最具代表性。

霍乱弧菌革兰氏染色形态（左）哈维氏弧菌革兰氏染色形态（右）

创伤弧菌革兰氏染色形态

       四、不动杆菌
       （1）菌落形态
       在TSA培养基29℃培养18小时，形成浅黄色、圆形、凸起的菌落。

培养18h菌落形态特征

       （2）革兰氏染色形态
       革兰氏染色阴性，圆形，椭圆形，散在排列或成双排列，无芽孢。

不动杆菌革兰氏染色形态

       五、海分枝杆菌
       （1）菌落形态
       在TSA培养基29℃培养7天以上才明显看到黄色菌落，堆叠状。革兰氏染色不着色，要用特定的抗酸染剂才能着色。

海分枝杆菌培养7天菌落形态

海分枝杆菌抗酸染色呈红色杆菌

       六、链球菌
       （1）菌落形态
       在TSA培养基上29℃培养42小时，呈白色针尖状小菌落（爱德华和链球菌有时候菌落形态比较相似，用革兰氏染色可区分）。在BHI培养基上培养时间一样，菌落长得稍大一点。常见有海豚链球菌、无乳链球菌。黄颡鱼链球菌多数为海豚链球菌，其他鱼类链球菌多为无乳链球菌。

长吻鮠链球菌培养42h菌落形态（左） 罗非鱼链球菌培养48h菌落形态（右）

       （2）革兰氏染色形态
       革兰氏染色阳性，球状，短链状排列，无芽孢。链球菌染色时容易出现假阴性，即显紫红色。

链球菌革兰氏染色形态

       七、格氏乳球菌
       （1）菌落形态
       在TSA培养基29℃培养24小时菌落很小，42小时才明显，很容易误认为链球菌。罗非鱼致病菌有链球菌和格氏乳球菌，两者均是阳性菌。两者的区别为链球菌革兰氏染色呈球状，格氏乳球菌呈椭圆形、小短杆、圆形，三种形态多数同时存在。

河鲀格氏乳球菌培养24h菌落形态

河鲀格氏乳球菌培养42h菌落形态

       （2）革兰氏染色形态
       革兰氏染色阳性，呈椭圆形、小短杆、圆形，成双或短链状排列，无芽孢。

格氏乳球菌革兰氏染色形态

          八、诺卡氏菌
         （1）菌落形态
       在TSA培养基上菌落像沙粒状，干燥，呈堆叠状。29℃培养3天以上。一般4-5天菌落才比较明显。

培养4-5天诺卡氏菌菌落形态

         （2）革兰氏染色形态
       革兰氏染色阳性，细杆状，多数呈树枝状形态。无芽孢。

诺卡氏菌革兰氏染色形态

        九、蜡样芽孢杆菌
         （1）菌落形态
       在TSA培养基上29℃培养18小时，菌落比气单胞菌大，圆形，边缘不整齐，表面粗糙，白色。

培养18h蜡样芽孢杆菌菌落形态

       （2）革兰氏染色形态
        革兰氏染色阳性，杆状，有时候可看见芽孢，多数呈双、短链排列。

蜡样芽孢杆菌革兰氏染色形态

       十、葡萄球菌
        （1）菌落形态
       在TSA培养基上29℃培养24小时或42小时。浅黄色或黄色菌落，圆形，凸起，边缘整齐。

葡萄球菌菌落形态

       （2）革兰氏染色形态
       革兰氏染色阳性，球状，呈葡萄形状排列，无芽孢。

葡萄球菌革兰氏染色形态

（转自“利洋水产”微信平台）

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