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标题: 关于诺卡氏菌的分离培养 [打印本页]

作者: leikunnuy 时间: 2017-9-21 14:50
标题: 关于诺卡氏菌的分离培养
诺卡氏菌主要在加州鲈鱼、海鲈、尖吻鲈、生鱼等养殖鱼类感染发病，近期有药店反应，加州鲈鱼的症状很像是诺卡氏菌引起的结节症状，但是就是分离不出来，是不是研究所提供的培养皿有问题？前几天出差，也遇见了典型诺卡氏菌症状的加州鲈鱼，我也用提供给药店的普通培养皿进行了分离，经过26℃培养，24小时候就能见到小沙粒样的诺卡氏菌。关于诺卡氏菌的分离培养，在此提醒大家：
1、用接种针直接直接培养，有可能接种不了细菌，最好可以用结节处或者结节直接涂培养皿，这样更加能够保证接种成功。
2、培养温度要保持在24~26℃，高于这个温度，诺卡氏菌也是长不出来的。

作者: jiayanwuu 时间: 2017-9-21 16:08
诺卡氏菌感染加州鲈鱼，会不会引起体表有脓疱，若有，据说把体表脓疱周围消毒后，用来分离可以较为容易分离出诺卡氏菌。

作者: leikunnuy 时间: 2017-9-21 16:15

jiayanwuu 发表于 2017-9-21 16:08
诺卡氏菌感染加州鲈鱼，会不会引起体表有脓疱，若有，据说把体表脓疱周围消毒后，用来分离可以较为容易分离 ...

诺卡氏菌感染加州鲈鱼，在内脏就会形成颗粒状的结节，在体表会形成脓包，脓包也容易分离出来诺卡氏菌，但是也需要涂布接种，用接种针有可能接不出来。另外就是要注意防止污染，污染了的话，杂菌长出来了，诺卡氏菌就长不出来了。

作者: tangsl 时间: 2017-9-21 16:24
南海所徐力文老师在去年年末给我们做海水鱼讲座的时候，说到从鳃盖、尾鳍基部等体表处接种，更容易分离到诺卡菌；而内脏器官的结节里面因为被组织包裹（目的是消灭细菌）活力下降，不好分离。
公司培训的时候，不参加。遇到问题也不知道咋解决。

作者: leikunnuy 时间: 2017-9-21 16:34

tangsl 发表于 2017-9-21 16:24
南海所徐力文老师在去年年末给我们做海水鱼讲座的时候，说到从鳃盖、尾鳍基部等体表处接种，更容易分 ...

有的刚刚开始发病的鱼，鳃盖和体表都还看不见明显的症状，解剖内脏，尤其是鳔里面已经很明显了，就我个人感觉来说，分离应该是没有多大的问题，主要是培养温度。这次出去采样，分离的基本都长出来了。

作者: 江上明月 时间: 2017-9-22 14:40
有药物可以治疗吗？

近期有点多了哦

作者: leikunnuy 时间: 2017-9-22 17:56

江上明月发表于 2017-9-22 14:40
有药物可以治疗吗？近期有点多了哦

治疗的话尽量选择对革兰氏阳性菌敏感的抗生素或者是广谱抗生素内服，药结合改底，这个细菌感觉是长期存在于底泥中。

作者: leikunnuy 时间: 2017-9-22 18:31
近期大家要注意预防诺卡氏菌，我们出去采集的样品，肉眼看内脏组织都是很正常的，但是做组织病理切片，都可以看见诺卡氏菌引起的结节了。

作者: 江上明月 时间: 2017-9-22 22:00

leikunnuy 发表于 2017-9-22 00:56
治疗的话尽量选择对革兰氏阳性菌敏感的抗生素或者是广谱抗生素内服，药结合改底，这个细菌感觉是长期存在 ...

感觉内服抗生素没效果，还是得死，目前还找不到啥好方法

作者: leikunnuy 时间: 2017-9-22 22:10

江上明月发表于 2017-9-22 22:00
感觉内服抗生素没效果，还是得死，目前还找不到啥好方法

主要是等肉眼看见明显的结节了，基本都是到了后期了！这个时候再用药效果差一些，还是只能早期预防。

作者: 虫下 时间: 2017-9-25 08:19
那发病也是这个水温吗？还是只有培养基才要求这样

作者: leikunnuy 时间: 2017-9-25 14:57

虫下发表于 2017-9-25 08:19
那发病也是这个水温吗？还是只有培养基才要求这样

发病的水温稍微要高一些，30℃的水温都有发病的了，现在养殖环境恶化的厉害，很多病害都不按照以前的发病规律发生了，很多病害的流行病学都需要再进行调查。

作者: leikunnuy 时间: 2017-9-25 15:27

虫下发表于 2017-9-25 08:19
那发病也是这个水温吗？还是只有培养基才要求这样

诺卡氏菌体外培养，也就是在培养皿中分离培养的温度尽量保持在26℃左右，快的话24小时就能见到小沙粒状的菌落。

作者: 天天狸 时间: 2017-9-28 20:27
可以现场印片、染色试试，方便快捷，就是对显微镜要求高点，多少大家平时应多爱护显微镜

作者: leikunnuy 时间: 2017-9-29 10:56

天天狸发表于 2017-9-28 20:27
可以现场印片、染色试试，方便快捷，就是对显微镜要求高点，多少大家平时应多爱护显微镜

是的，这样的对于药店诊断没有问题，但是药店人员也想把这个菌分离出来，给养殖户看看啊。其实现在诺卡氏菌根据临床症状就可以判断了，分离出来主要是为了给养殖户一个交代。

作者: leikunnuy 时间: 2017-9-29 11:05
在实验室，打开空调，26℃下培养48小时，长出来的诺卡氏菌，看着感觉还是挺舒服的，诺卡氏菌，体外培养温度一定要在26℃左右。

诺卡氏菌.png (630.79 KB, 下载次数: 262)

作者: leikunnuy 时间: 2018-9-17 08:51
大家注意，在进行诺卡氏菌的分离的时候，注意避免污染，如果污染了杂菌，杂菌的生长速度比诺卡氏菌的生长速度快，一旦杂菌长出来了，消耗了培养皿中的营养物质，诺卡氏菌就有可能长不出来了。

药店在进行分离培养的时候，培养的温度可能不一定很合适，因此需要尽可能多培养一段时间。

作者: leikunnuy 时间: 2018-9-17 08:54
近期加州鲈鱼诺卡氏菌病高发，多个药店已经反映，加州鲈鱼的诺卡氏菌都有明显的结节症状，只要看见症状，基本可以确诊，确诊后及时处理，不要纠结于是否分离出来细菌，这样可能会耽误治疗。

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