[每周一例]春季杀虫后诱发黄颡鱼发病大量死亡

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[病例598]广东佛山南海区丹灶镇一黄颡鱼养殖池塘，面积5亩，平均水深3米，4台1.5kW的叶轮式增氧机（图1）。2020年9月过塘平均规格40尾/斤的黄颡鱼苗5700斤。2021年2月22日，规格达2两左右，卖鱼14800斤，大约剩11600斤。
       2月27日，另外一个塘卖鱼后过塘平均规格23尾/斤的黄颡鱼2000斤到该养殖池塘，共存塘约13600斤。
       3月6日，中雨，喂料5包。
       3月7日，阴，外用6瓶“倍力灭”常规消毒。
       3月8日，阴转晴，早上发现少量鱼靠边、游水，外泼“速解安”10包+“激活”8包+“底加氧”半包。检查4尾病鱼下颌发红，鳃上有大量斜管虫，内脏充血。下午五点用甲醛270斤杀斜管虫，用后死鱼80斤。
       3月9日，阴，死鱼200斤，少量游水，检查病鱼下颌严重充血，白鳃，鳃上无虫。
       3月10日，阴，死鱼242斤。早上泼解毒抗应激的药物，病鱼游水，检查病鱼下颌发红。中午使用“速解安”1件+“激活”1件，往池塘加水12公分，傍晚用 “底加氧”20斤。
       3月11日，阴，死鱼389斤，少量游水，七成以上死鱼是旧鱼，继续加水约12公分，中午泼“速解安”1件+“激活”1件，傍晚用“苯扎溴铵”消毒。
       3月12日，晴，死鱼579斤，约85%的死鱼是身体已经发白的旧鱼，下午撒“底加氧”10斤。
       3月13日，阴，死鱼691斤，九成死鱼是旧鱼，下午外用解毒和改底的药物。
       3月14日，阴，死鱼933斤，九成死鱼是旧鱼，中午外用“营养快线”1件。
       3月15日，晴，死鱼808斤，九成五死鱼是旧鱼，中午外用“营养快线”1件。
       3月16日，晴，死鱼612斤，九成五死鱼旧鱼，下午泼盐1500斤。
       3月17日，晴，死鱼580斤。上午12点，到该养殖池塘现场调查，用快速水质测试盒测定水质指标：pH值7.5，氨氮1.0mg/L，亚硝酸盐0.1 mg/L；用哈希溶氧仪测定池塘水温24.7℃，溶解氧7.56mg/L，饱和度91.5%。观察塘边有少量趴边的病鱼，塘中有少量病鱼游水。从塘边取2尾趴边的病鱼，外观病鱼鳍条溃烂，鳍基发红、肿胀（图2），下颌发红，肛门红肿（图3）。解剖病鱼鳃发白，有少量出血点（图4）；打开腹腔有少量腹水，肝脏发黄、出血（图5），脾脏充血，肾脏充血、肿大（图6）；脑无明显病变（图7）。分别从病鱼的腹水、脑、肝脏和肾脏中接种胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）培养基进行细菌分离培养，并取鳃、肝脏、脾脏、肾脏和脑组织分别用95%酒精和10%的甲醛固定保存，带回公司研究所进行病毒检测和组织病理切片观察。当天晚上使用15斤“底加氧”改底。
       3月18日，晴，死鱼450斤。
       3月19日，晴，死鱼350斤，使用高锰酸钾24斤。
       3月20日，晴，死鱼300斤。
       3月21日，阴，死鱼287斤，吃料5斤。
       3月22-27日，阴，每天死鱼从120斤逐渐下降到50斤，吃料逐渐增加到80斤。逐渐趋向稳定。  
       结果：采用实验室普通（RT-）PCR检测方法，对采集的2尾病鱼的脑、鳃、肝脏、肾脏组织进行肿大病毒属虹彩病毒（RSIV）、蛙虹彩病毒（LMBV）、弹状病毒（SCRV）、神经坏死病毒（VNNV）、草鱼出血病病毒（GCRV）检测，结果均为阴性。经28℃培养48h，2尾病鱼的腹水、肝脏和肾脏中均能分离出大量菌落，脑中未分理出细菌（图8），其中1尾病鱼的肝脏和肾脏中分离出大量圆形光滑、边缘整齐、稍隆起的无色小菌落，经过16S rDNA测序鉴定为鮰爱德华氏菌（Edwardsiella ictaluri）；腹水和另外1尾病鱼的肝脏、肾脏和腹水中分理出大量圆形光滑、边缘整齐、隆起、不透明的菌落，经过16S rDNA测序鉴定为类志贺邻单胞菌（Plesiomonas shigelloides）。分别对两种分离菌进行药敏试验，结果显示两种菌均对 “肠苷康”敏感（见图9）。组织病理切片结果显示：病鱼鳃组织缺血，可见坏死区；肝脏颗粒变性、组织坏死；脾脏组织细胞坏死；肾脏组织局部淋巴细胞散在坏死；脑正常（见图10）。

       分析：1、本病例中在拉网卖鱼、过塘和消毒等应激性操作后又使用甲醛杀虫，黄颡鱼开始出现发病、死亡。从发病黄颡鱼分离到的鮰爱德华氏菌是鲇形目鱼类的重要致病菌，类志贺邻单胞菌是广泛分布在淡水环境中的细菌，也能引起水生动物发病，本案例黄颡鱼发病死亡可能与继发感染这两种细菌有关。
       2、甲醛是往年春季治疗黄颡鱼寄生虫的常用药，多数池塘用药治疗效果好，一般不会出现刺激增加死亡，今年春季多数池塘使用甲醛后黄颡鱼大量死亡，原因还不确定，本案例发病黄颡鱼具有典型“红头”症状，是否感染病毒病有待进一步调查。 （利洋公司研究所一室 雷燕 区燕云  利洋水产药店 丹灶店 梁万里 提供 2021.6.24）