[每周一例]鳜鱼神经坏死病毒（VNNV）和蛙虹彩病毒（MRV）共同感染

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[病例522]广东省佛山市三水区有一鳜鱼养殖池塘（图1），面积5亩，水深2米，配备4台1.5kW叶轮式增氧机，1台水车式增氧机。
       2019年7月16日，放鳜鱼苗3.3万尾，规格4～6cm/尾。水车井水运输。
       7月17日，出现少量死亡，鱼苗烂身，零星打转，水面侧躺漂浮，部分鱼苗黑身。
       塘主使用大量消毒剂、抗菌药物消毒，之后鱼苗大量死亡，越治疗死亡越多，死亡高峰达到1000尾/天左右。期间一直有在水面黑身打转鱼和烂身鱼。
       7月23日，带鱼上店检查，鱼苗规格约7～8cm，绝大多数病鱼都有不同程度的烂身（图3），镜检鳃上未见寄生虫。
       之后加大增氧、稳水、抗应激，每天死亡稳定在500-600尾。
       7月29日，到塘头查看，水色为黄浊色，有部分鱼水面漫游，少量水面漂浮侧躺，养殖户称为“睡觉鱼”（图2），打捞病鱼起来观察，发现多数鱼烂身（图4），黑身。解剖见个别鱼鳃丝苍白（图5），压片镜检鳃丝、内脏器官未见寄生虫。
       取5尾发病鱼，分别从肝脏和肾脏组织接种至胰蛋白胨大豆琼脂培养基（TSA），进行细菌分离培养；取脑、眼及内脏组织用95%酒精固定，PCR方法检测病毒；取脑、眼及内脏组织波恩氏液固定做组织病理切片观察。结果：30℃室温条件下培养24小时，部分病鱼肝脏和肾脏长出优势菌落（图6），经16S rDNA测序鉴定，编号“1-5肝”为气单胞菌属（Aeromonas sp.）；“1-3肾”的小菌落为为假单胞菌属（Pseudomonas sp.）；病鱼的眼、脑组织经实验室普通PCR检测病毒性神经坏死病毒（VNNV）、蛙虹彩病毒（MRV）呈阳性，弹状病毒（SCRV）、传染性脾肾坏死病毒(ISKNV) 呈阴性；组织病理切片结果见发病鱼脑组织可见少量的空泡，眼组织坏死，视网膜崩解，胃水肿，肝、脾、肾、肠、鳃组织均有坏死（图7）。  
       之后由于一直有死亡，养殖户放弃治疗，放入大量鲮鱼仔，改养饵料鱼。

       分析：1、本病例发病鱼实验室PCR检测病毒性神经坏死病毒（VNNV）、蛙虹彩病毒（MRV）呈阳性，病鱼具有神经坏死病毒病黑身、打转和特征性的脑组织空泡化的病理特征，也具有蛙虹彩病毒病体表溃烂的特征症状，因此发病鱼可能同时感染两种病毒并发病。
       2、发病前使用未经过曝晒的低温水运输，温差过大和长途运输可能是诱发发病的因素，发病后盲目使用刺激性较大的消毒剂等消毒又增加了发病鱼死亡。（利洋水产药店 三水店 张存宁 研究所一室 戚瑞荣 张会军 王小霞 提供 2019.10.10）