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[每周一例]低温期草鱼溃烂,分离出鲁氏耶尔森氏菌(Yersinia ruckeri)

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发表于 2019-5-9 09:48:35 | 显示全部楼层 |阅读模式
[病例499]江苏省盐城市黄沙河镇一养殖池塘,面积53亩,平均水深1.7米,配备7台3kW的叶轮式增氧机、1台3kW的涌浪机、池塘底部有微孔增氧管(约3kW)(见图1)。2019年3月中旬一次性放自养2龄草鱼种2.2万尾(平均规格1.68斤/尾)、鲫鱼5万尾(平均规格1.5两/尾)、鳙鱼4000尾(平均规格7两/尾)、白鲢3000尾(平均规格1斤/尾)。
       3月20日,外用硫醚沙星,预防水霉病。
       3月25日,外用碘制剂消毒,预防水霉病。
       3月27日,天气闷热,开始发病,当天发现草鱼死亡4尾。
       3月28日,草鱼死亡5尾,中午改底,使用“福地安”9瓶。
       3月29日,草鱼死亡8尾。
       3月30日,草鱼死亡10尾。
       3月31日,草鱼死亡12尾,外用34瓶“永乐碘”和30包“肤友康”。
       4月1日,草鱼死亡23尾,发病期间只死草鱼,鲫鱼偶有零星死亡。下午3点半到该养殖池塘,测定水质指标:上层水溶解氧13.41mg/L,饱和度126%,水温16.6℃;下层溶解氧10.86mg/L、饱和度106%,水温14.7℃;pH值9.0、氨氮、亚硝酸盐测不出。
       从塘边取4尾游水的病鱼,检查发病鱼烂身、烂尾,个别头部发红;严重者肌肉完全溃烂穿孔(见图2、3),解剖鳃无明显异常(见图4),镜检鳃无虫,少数鳃丝贫血、挂脏。病鱼脾脏肿大发黑、肠道微红,无食(见图5);鳔后室严重充血(见图6);肾脏肿大(见图7)。分别从4尾病鱼的溃烂处、溃烂处肌肉、肝脏和肾脏接种进行细菌分离培养;取脾、肾组织用95%酒精固定检测病毒;取溃烂处肌肉用波恩氏固定液固定做组织病理切片观察。
       4月2日,死草鱼40尾。
       4月3日,死草鱼60尾。
       4月4日,死草鱼70尾,用碘制剂消毒。
       4月5日-9日,每天死草鱼200尾左右。整个发病期间水温较低,鱼不吃料,未进行内服治疗。
       结果:病鱼组织经实验室PCR检测草鱼出血病病毒(GCRV)呈阴性(见图8),对其它鲤科鱼类病毒如鲤春病毒血症病毒(SVC)、鲤疱疹病毒2型(CyHV-2)、锦鲤疱疹病毒(KHV)、鲤浮肿病毒(CEV)等也呈阴性。从病鱼接种胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)培养皿,室温(18℃)培养36小时,病鱼体表溃烂处、溃烂处肌肉、肝脏和肾脏中分离出大量细菌,其中肝脏和肾脏分离菌单一,菌落形态呈圆形、隆起、边缘整齐、有光泽、乳白色(见图9),溃烂处和肌肉处分离的细菌从菌落形态上看有3种以上细菌,分别挑取肝脏和肾脏分离菌1株,溃烂处和肌肉分离的优势菌1株,进行16S DNA测序鉴定,两株菌经鉴定均为鲁氏耶尔森氏菌(Yersinia ruckeri);对分离菌进行药敏试验,该分离菌对“出败康”、“代金康”、“肠苷康”、“菌炎好迪”、“氟多力”等抗菌药物敏感(见图10)。肌肉组织病理切片可见组织坏死严重,多呈糜样,局部淤血、多细胞浸润,可见气泡痕迹(见图11)。

       分析:1、据资料鲁氏耶尔森氏菌主要为冷水性鲑鳟鱼类的病原菌,该菌也是鲢、鳙等其它鱼类低温期细菌性败血症的致病菌。本案例在低温期发病草鱼溃烂处和内脏器官分离到大量菌落特征一致的细菌,经初步鉴定也是该菌,常见病毒检测阴性,因此本案例可能是鲁氏耶尔森氏菌引起的发病。
       2、本病例病鱼肌肉组织病理切片可见较多气泡印迹,气泡病可能起到诱发发病或增加发病鱼死亡的作用,与发病期天气频繁剧烈变化有关。(利洋研究所一室 雷燕 戚瑞荣 王小霞 利洋水产药店黄沙河店 袁远 提供 2019.05.09)
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发表于 2019-5-10 16:00:10 来自手机 | 显示全部楼层
本帖最后由 tangsl 于 2019-5-10 16:16 编辑

以上几种病毒PCR检测呈阴性,研究所本次对江苏盐城发病案例的检测结果和四川农大汪开毓老师的检测结果相同,都主要是鲁氏耶而尔森氏菌和维氏气单胞菌(下周每周一例),前者是典型的低温期致病菌,后者这几年在各种发病的淡水鱼检出率极高,也属于“罪大恶极”。汪老师还分离到一种其它种类的气单胞菌。看到有报道华中农大的老师在某地的发病草鱼检测到鲤春病毒,好像是从两个发病池塘的病鱼检测到的,可能不是普遍的发病病因。
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发表于 2019-5-10 16:02:00 | 显示全部楼层
鲁氏耶尔森氏菌一般在冷水性鲑鳟鱼类上比较常见,没想到也能感染草鱼。
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发表于 2019-5-10 16:20:45 来自手机 | 显示全部楼层
在花白鲢、叉尾鮰等鱼淡水鱼都有报道,低温期,溃烂和败血症,流行和症状都和目前的草鱼差不多。
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发表于 2019-5-10 16:25:22 来自手机 | 显示全部楼层
本帖最后由 tangsl 于 2019-5-14 08:42 编辑

从全国各地的利洋药店反馈目前这个病的流行情况看,华南已经过去了,华中在升温的天气,水温上升到20℃以上明显死亡下降,又来寒流回到20以下死亡又上来了,而华北东北西北地区正是发病死亡高峰。主要流行水温高峰是10-20℃,与鲁氏耶耳森氏菌相同,也与鲤春病毒相同。
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发表于 2019-5-11 15:53:01 | 显示全部楼层
tangsl 发表于 2019-5-10 16:00
以上几种病毒PCR检测呈阴性,研究所本次对江苏盐城发病案例的检测结果和四川农大汪开毓老师的检测结果相同 ...

看了华中农大老师的报道之后,我们自己将采集的病料进行了鲤春病毒血症病毒(SVCV)的检测,同时也将病料寄送深圳检验检疫局进行检测,江苏采集的病料SVCV均呈阴性。
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发表于 2019-5-11 15:56:05 | 显示全部楼层
利洋小七儿 发表于 2019-5-10 16:02
鲁氏耶尔森氏菌一般在冷水性鲑鳟鱼类上比较常见,没想到也能感染草鱼。

淡水鱼上的鲢鱼、鳙鱼、鲟鱼都有报道的,我们去江苏采集的草鱼分离到耶氏鲁尔森氏菌,湖北药店从发生溃烂病的草鱼体内分离的细菌,邮寄研究所鉴定,通过16SrDNA测序也鉴定为鲁氏耶尔森氏菌。
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发表于 2019-5-14 09:05:12 | 显示全部楼层
看来这个 鲁氏耶尔森氏菌 到处肆虐,也属于罪大恶极之徒。搞不明白为什么今年春天忽然之间大江南北 黄河上下 江河湖泊 各种水体的草鱼都发生了这个病?是商量好了?还是今年的气候条件就正好符合这货的生长繁殖,因而在全国各地就都支棱起来了?
唐绍林
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发表于 2019-5-14 09:12:21 | 显示全部楼层
本帖最后由 tangsl 于 2019-5-14 09:17 编辑
leikunnuy 发表于 2019-5-11 15:53
看了华中农大老师的报道之后,我们自己将采集的病料进行了鲤春病毒血症病毒(SVCV)的检测,同时也将病料 ...


症状上看发病草鱼普遍有鲤鱼患鲤春病毒血症病毒的鳔出血的症状(草鱼多数鳔充血),流行上也是鲤春病毒血症的10-20度,药物敏感性上很多病例内服和外用抗菌药物没有明显效果甚至死亡加重也与病毒病的特征相似,如果不经过实验室检测,很有可能都诊断成鲤春病毒血症。
唐绍林
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发表于 2019-5-15 10:00:58 | 显示全部楼层
tangsl 发表于 2019-5-14 09:05
看来这个 鲁氏耶尔森氏菌 到处肆虐,也属于罪大恶极之徒。搞不明白为什么今年春天忽然之间大江南北 黄河上 ...

这个鲁氏耶尔森氏菌在普通培养皿上的菌落形态、大小、色泽跟气单胞菌的一致,所以肉眼观察很容易判断成气单胞菌。我们也是经过初步鉴定才大概知道这个菌的。四川那边发生溃烂病的草鱼也分离到细菌,药店认为是气单胞菌,但是没有鉴定,我估计也有可能是鲁氏耶尔森氏菌。
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发表于 2019-5-15 10:04:05 | 显示全部楼层
tangsl 发表于 2019-5-14 09:12
症状上看发病草鱼普遍有鲤鱼患鲤春病毒血症病毒的鳔出血的症状(草鱼多数鳔充血),流行上也是鲤春病毒 ...

我解剖的鱼,鳔都有出血的情况,但是都是后鳔出血,前鳔没有出血。后来药店也寄送了两次草鱼的病料,检测了鲤春病毒血症病毒(SVCV),也是阴性的。以后再有这样的病料,我们继续跟踪SVCV的检测。
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