[每周一例]池塘养殖发病罗非鱼检出罗湖病毒

利洋服务

[病例414]海南省文昌市一罗非鱼养殖池塘，面积15亩，平均水深2米，1台1.5kW增氧机（见图1），2016年11月一次性投放罗非鱼苗20万尾。2017年2月底过塘一部分到其它池塘，该池塘剩下5.5万尾罗非鱼，目前平均规格200g/尾。该池塘混养有规格750g/尾的花鲢500尾。
       2017年4月初开始发病，开始发病时水温27℃，刚开始时每天死鱼约20尾左右，发病20天后出现死亡高峰，高峰期每天死鱼400多尾。后来通过调水、改底，病情得到了一定的控制。
       5月10日，死鱼100多尾，塘主取2尾病鱼到当地利洋水产药店检查，镜检病鱼鳃丝无寄生虫，药店技术人员取2尾鱼的鳃、肝、脾、肾组织用95%固定送研究所进行病毒检测，经过实验室RT-PCR检测结果显示，2尾病鱼罗湖病毒（Tilapia Lake Virus，TiLV）呈阳性（见图2），序列测定比对结果显示其与GenBank中罗湖病毒的序列同源性为96%。送检病鱼后，该养殖户根据技术员的建议使用“碧水安”调水，内服“出败康”，但无明显效果，后来内服了一些其它的抗菌药物，病情得到控制，无死鱼。
       5月31日，该池塘又开始出现死鱼，当天死鱼10多尾。
       6月1日，死鱼30多尾，下午5点到该池塘，在池塘下风口漂浮着死鱼（见图3）。测定水温31.6℃，水质指标：pH值8.0、氨氮0.6mg/L、亚硝酸盐0.2 mg/L、溶解氧7.37mg/L。从塘边取3尾趴边的病鱼（见图4）。
       6月2日，早上捞死鱼60尾。从料台附近取2尾“正常”鱼，从塘边取刚死亡的鱼1尾（见图4），外观所取病鱼体色发黑，个别病鱼眼睛凹陷。解剖见个别病鱼鳃出血，鳃盖內缘出血（见图5），肝脏肿大、出血（见图6），胆囊肿大、脾脏肿大发黑、有出血点，肠腔空，肠道充满黄色积液（见图7），肾脏严重出血（见图8）。分别从所取6尾鱼的肝脏和肾脏中接种进行细菌分离培养，并取病鱼的鳃、肝脏、脾脏、肾脏组织用冰盒冷冻保存，带回实验室做病毒检测。
       结果：6尾鱼中有2尾肝脏和肾脏中分离出气单胞菌（见图9），通过实验室RT-PCR检测，所取6尾鱼有5尾罗湖病毒呈阳性（见图10）。
       分析：1、罗非鱼罗湖病毒（Tilapia Lake Virus，TiLV）于2009年在以色列发病的养殖罗非鱼发现并报道，该病能够导致养殖的罗非鱼大量死亡，目前该病毒已经在以色列、哥伦比亚、厄瓜多尔、埃及、泰国养殖发病的罗非鱼中得到确认。本病例通过实验室RT-PCR和序列测定确定采集的罗非鱼样品中罗湖病毒呈阳性，是我国养殖罗非鱼首次检测出。
       2、本病例中发病罗非鱼的主要症状是内脏组织出血，但是由于调查的病例少，难以作为罗非鱼罗湖病毒病的临床诊断依据。从细菌分离结果看，个别鱼还出现了细菌继发感染的情况，因此临床上处理该病的时应注意防细菌继发感染。第一次发病后通过处理死亡停止，第二次又开始发病死亡，原因可能是气温变化引起水温变化使病毒病反复发作和治疗细菌继发感染治愈后又复发有关。（利洋公司研究所 雷燕  利洋水产药店潭牛店 赵振峰 李海涛提供 2017.06.08）

tangsl

     新病，下一步重点工作是确定病原与发病的关系，也就是检测到病原的发病池塘罗非鱼是不是这个病毒引起的发病，以及其它主养罗非鱼地区发病鱼的检测，从而了解目前这个病毒在我国罗非鱼养殖的危害。
      确定是该病毒引起的发病以后，就要总结典型症状（单纯感染鱼的症状总结）、流行情况（发病水温、易感群体、主要传染方式、诱发因素、影响死亡因素、养殖模式的关系等等一切和发病有关的因素），目的是尽快找到该病在我国的防控措施，指导养殖户养殖生产。
      至于病原的实验室研究，与我们的关系不大，我们属于“搂草打兔子”

leikunnuy

据弄菜宝典(农财宝典）报道，台湾池塘养殖的发病罗非鱼中也检测出罗湖病毒，看来这个病毒流行的范围还是比较广。

leikunnuy

9月份采集的罗非鱼病料都还能检测出来罗湖病毒，看来这个病毒的流行时间还是比较长，现在国家也比较重视这个病毒，我们也应该引起注意。下一步我们应该注意调查流行病学，防止这个病毒扩散。

leikunnuy

2017.10.13，我们从海南翁田寄送的6例罗非鱼样品中检测到1例罗湖病毒阳性。广东海洋大学一老师说他们也在茂名的一个罗非鱼养殖场检测到罗湖病毒。