[每周一例] 无乳链球菌引起牛蛙发病

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[病例319]福建省漳州市诏安县一牛蛙养殖场，有水泥池塘10多面，养殖成蛙，8月初发病时牛蛙规格200克/只。养殖期间全场每天都有几十只死亡，2012年8月初死亡量增加，开始每天死亡量几斤，次日上升到几十斤，第三天死亡几百斤，之后内服阿莫西林等抗菌药物后死亡很快下降，至8月13日每天死亡100斤。
       8月13日到池塘调查，观察病蛙全身水肿（图1、图2），解剖病蛙见腿部皮肤与肌肉间有大量积水（见图3），内脏解剖见腹腔中有大量腹水，肠道和胃积水，有些在胃与肠交接处出现套叠现象，肝脏严重充血、出血、肿大、发硬，其它内脏器官均充血、出血（图4）。从塘中取1只发病牛蛙（蛙W-1，见图1）和1只无明显疾病症状的蛙（蛙W-2），分别从两只牛蛙的脑、肝脏、肌肉和腹水中接种进行细菌分离培养，取肝脏、肾脏，脑和肠道用95%酒精保存，做病毒检测，并取肝脏、脾脏和肾脏用波恩氏液固定，做组织病理切片观察。
       结果：病蛙的脑、肝脏、肌肉和腹水中均分离出大量圆形、光滑、半透明，直径0.5~1mm的菌落（见图5、图6），分离菌呈革兰氏阳性，球状，单个或成对或成短链排列（见图7），经过16S rDNA测序鉴定为无乳链球菌；经PCR检测，两条蛙均检测出有蛙虹彩病毒（目的片段长545bp）（见图8）；病理切片见肝脏有散在坏死（见图9），脾脏严重坏死（见图10），肾脏有坏死灶（见图11）。
       分析：1、本病例从病蛙体内分离出无乳链球菌，内服治疗革兰氏阳性菌的药物后死亡量下降，病蛙也具有内脏出血、充血，腹水、肠套叠等蛙链球菌病的症状，因此本病是链球菌引起的牛蛙发病。
       2、所取的2只发病蛙和外观正常的蛙均检出感染蛙虹彩病毒，蛙虹彩病毒也可以引起全身性出血，但本病例内服抗菌药物治疗有效，根据现有资料还不能确定蛙虹彩病毒在本病例中是否有致病作用。（利洋研究所 雷燕 戚瑞荣 利洋技术部 唐绍林提供 2015.02.05）