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标题: 中华乌塘鳢检出真鲷虹彩病毒 [打印本页]

作者: leikunnuy 时间: 2013-10-19 15:23
标题: 中华乌塘鳢检出真鲷虹彩病毒
2013年10月16日收到药店杏陈店3份样品（见图1），不知道是什么鱼的样品，打电话给裴店长，裴店长告知是发病中华乌塘鳢的样品，中华乌塘鳢属于鲈形目，要求检测真鲷虹彩病毒。

图1 杏陈店所送3份中华乌塘鳢病毒检测样品.JPG (2.04 MB, 下载次数: 203)

作者: leikunnuy 时间: 2013-10-19 15:24
按照裴店长的要求，我们对病料进行了处理（其中编号A的样品取了2个检测样品），抽提DNA，利用OIE推荐的引物PCR检测真鲷了虹彩病毒，PCR产物电泳可见B和C样品中扩增出了长为570bp的目的条带，A样品种的2个检测样品无目的条带，阴性对照无条带（见图2），因此，B和C样品相对应的中华乌塘鳢真鲷虹彩病毒呈阳性。

图2 中华乌塘鳢真鲷虹彩病毒检测结果.jpg (107.17 KB, 下载次数: 172)

作者: tangsl 时间: 2013-10-19 15:59
这个鱼和笋壳鱼亲缘关系最近，笋壳鱼的虹彩病毒危害很大，所以在土鱼身上检测出来，合情合理。这是你们的又一个发现。了解一下发病特征，写一个病例。

作者: tangsl 时间: 2013-10-19 16:02
药店水平也见长啊，还知道可能是真鲷虹彩病毒，有目的的检测，值得我们大家学习。

作者: lwr2012 时间: 2013-10-19 16:14
都是考兽医给逼的

能当上店长，水平自然差不了

作者: leikunnuy 时间: 2013-10-19 17:23
目的PCR片段，我们还会进一步进行序列测定，确定克隆出来的片段是否为真鲷虹彩病毒基因组的序列片段。

作者: leikunnuy 时间: 2013-10-19 17:25
今天也跟裴店长联系了，最近在他那里，这个鱼发病率比较高，还会再采样，我们也会进一步检测进行确诊。

作者: leikunnuy 时间: 2013-10-19 17:28
本帖最后由 leikunnuy 于 2013-10-19 17:48 编辑

学习一下：中华乌塘鳢栖息于浅海、内湾和河口咸淡水水域，亦进入淡水，冬季潜在泥砂底中越冬。其性凶猛，摄食小鱼、虾蟹类、水生昆虫和贝类。分布于我国黄海南部，东海，南海以及日本海域。其生命力强，适应性广，抗病力强，生长快，是人工养殖的优良品种。中华乌塘鳢营养丰富，肉味鲜美，并具有使伤口加快愈合的功效，另外，该鱼最大特点为离水在阴湿条件下可保持一星期不死亡，是一种适宜活运远销和出口创汇的良好海鲜品种之一。

作者: leikunnuy 时间: 2013-10-19 17:50

tangsl 发表于 2013-10-19 16:02
药店水平也见长啊，还知道可能是真鲷虹彩病毒，有目的的检测，值得我们大家学习。

哎！看来我们的能力有待提高了，目前的水平已经落后药店了，加强学习。

作者: leikunnuy 时间: 2013-10-19 17:52

lwr2012 发表于 2013-10-19 16:14
都是考兽医给逼的能当上店长，水平自然差不了

鲈形目，还有啥子目？分类是个很复杂的问题，搞不懂！还记得刚刚来的时候，唐老师出的试卷，考试，考分类的，我一个都没有回答出来。

作者: lwr2012 时间: 2013-10-21 10:11

leikunnuy 发表于 2013-10-19 17:52
鲈形目，还有啥子目？分类是个很复杂的问题，搞不懂！还记得刚刚来的时候，唐老师出的试卷，考试，考分类 ...

多了去喽，鲈形目是最大的一目，还有鲤形目、鲻形目、鲀形目、鲽形目、鮋形目、鲑形目、鲇形目....要是每说一个给一两银，我就再多说几个

作者: leikunnuy 时间: 2013-10-21 10:42
一起学习一下嘛，还要给拜师费不成？

作者: dongshan 时间: 2013-10-21 20:22
病料采集好了，一共5组，15条鱼。明天就会寄出去，照片和对应病例已发到雷老师企业邮箱。花了一个下午的功夫

作者: leikunnuy 时间: 2013-10-22 08:34

dongshan 发表于 2013-10-21 20:22
病料采集好了，一共5组，15条鱼。明天就会寄出去，照片和对应病例已发到雷老师企业邮箱。花了一个下午的功夫 ...

辛苦了，有结果了，我们会第一时间通知你们。谢谢合作！

作者: leikunnuy 时间: 2013-10-22 17:16
刚刚收到测序结果，比对了，阳性片段的基因序列跟真鲷虹彩病毒（Red sea bream iridovirus）的基因序列同源性为99.2%

作者: dongshan 时间: 2013-10-23 19:11
我们的病料有收到吗？

作者: leikunnuy 时间: 2013-10-24 08:31

dongshan 发表于 2013-10-23 19:11
我们的病料有收到吗？

现在还没有收到，估计今天应该能到吧，到了，我们会在第一时间检测并告知你检测结果。

作者: leikunnuy 时间: 2013-10-29 09:08

dongshan 发表于 2013-10-21 20:22
病料采集好了，一共5组，15条鱼。明天就会寄出去，照片和对应病例已发到雷老师企业邮箱。花了一个下午的功夫 ...

检测结果已经发送至裴店长企业邮箱了，请查收。

作者: leikunnuy 时间: 2013-10-29 09:14
2013年10月26日收到杏陈店送第二批5个客户（每个客户3尾鱼）的共计15尾鱼的样品，经检测其中5尾鱼真鲷虹彩病毒呈阳性，5个客户只有一个客户的鱼无病毒。

作者: leikunnuy 时间: 2013-10-29 09:21
据发送的发病情况来看，真鲷虹彩病毒对中华乌塘鳢的危害还是挺大的，因为后面涉及到病例问题，在这里就不公布电泳图了，敬请大家关注病例（每周一例）。

作者: leikunnuy 时间: 2013-11-2 21:24

lwr2012 发表于 2013-10-21 10:11
多了去喽，鲈形目是最大的一目，还有鲤形目、鲻形目、鲀形目、鲽形目、鮋形目、鲑形目、鲇形目....要是每 ...

2012，请教一下，除了鲈形目，还有那些目的什么鱼容易感染虹彩病毒？

作者: dongshan 时间: 2013-11-3 07:42
已经收到了，虹彩病毒可感染的鱼类很多，只是鲈形目比较易感染，另外想鲽形目等也会受到感染。参考>>山东沿海部分地区真鲷虹彩病毒病初步调查与分析“。。

QQ截图20131103073346.png (227.76 KB, 下载次数: 264)

作者: tangsl 时间: 2013-11-6 19:46
还是叫“肿大细胞属虹彩病毒”比较准确。

作者: 唿路 时间: 2013-11-7 19:26

leikunnuy 发表于 2013-10-22 17:16
刚刚收到测序结果，比对了，阳性片段的基因序列跟真鲷虹彩病毒（Red sea bream iridovirus）的基因序列同源 ...

能具体介绍下真鲷虹彩病毒的情况吗

作者: leikunnuy 时间: 2013-11-7 22:59

唿路发表于 2013-11-7 19:26
能具体介绍下真鲷虹彩病毒的情况吗

应该听从楼上唐老师的建议，还是应该叫“肿大病毒属虹彩病毒”。真鲷虹彩病毒属于虹彩病毒科肿大病毒属。虹彩病毒科肿大病毒属的病毒能够引起60多种海淡水鱼类感染发病，其主要的特征就是在脾脏、肾脏等组织中形成肿大细胞。

作者: leikunnuy 时间: 2013-11-7 23:10

唿路发表于 2013-11-7 19:26
能具体介绍下真鲷虹彩病毒的情况吗

我们从中华乌塘鳢检测的PCR片段测序，其序列同源性与真鲷虹彩病毒基因同源性为99%，但不能说这就是真鲷虹彩病毒。应该说是肿大病毒属虹彩病毒更准确一些（或者是中华乌塘鳢虹彩病毒）。因为如大黄鱼虹彩病毒、大菱鲆虹彩病毒、石斑鱼虹彩病毒等都是从相应的鱼种上分离鉴定的，但是他们都属于肿大病毒属虹彩病毒。

作者: 渔夫来啦 时间: 2013-11-8 18:40
是否考虑做回归实验？

作者: tangsl 时间: 2013-11-8 21:34

渔夫来啦发表于 2013-11-8 18:40
是否考虑做回归实验？

那太麻烦，我们做不了，不是细菌。要确诊，根据症状和病理切片或印片就可以了。

作者: leikunnuy 时间: 2013-11-9 11:31

渔夫来啦发表于 2013-11-8 18:40
是否考虑做回归实验？

病毒的回归实验确实比较麻烦，首先，我们得饲养健康且不带毒的中华乌塘鳢，其次，我们得去采集发病的且确实带毒的病鱼，并用低温保存的方式保存病料，回来之后将病料处理，匀浆，用超微滤膜过滤，收集病毒液，再加双抗处理，处理完后接种鱼，这一系列的工作做下来，没有半年的时间完不成。

作者: 渔夫来啦 时间: 2013-11-9 11:52

leikunnuy 发表于 2013-11-9 11:31:53

病毒的回归实验确实比较麻烦，首先，我们得饲养健康且不带毒的中华乌塘鳢，其次，我们得去采集发病的且确实带毒的病鱼，并用低温保存的方式保存病料，回来之后将病料处理，匀浆，用超微滤膜过滤，收集病毒液，再加

不是每一种虹彩病毒都有致病性的哦（5/15检出率）。何况发病的鱼不一定都带病毒，即便病毒携带也不一定发病。如何来证明病毒对中华乌塘li的致病性？

作者: 渔夫来啦 时间: 2013-11-9 11:53

tangsl 发表于 2013-11-8 21:34:03

那太麻烦，我们做不了，不是细菌。要确诊，根据症状和病理切片或印片就可以了。

哈哈，坐等每周一例

作者: leikunnuy 时间: 2013-11-9 14:25

渔夫来啦发表于 2013-11-9 11:52
不是每一种虹彩病毒都有致病性的哦（5/15检出率）。何况发病的鱼不一定都带病毒，即便病毒携带也不一定发 ...

诱因、病因、死亡原因，这三个都得分析，我们只是做了其中一块，就是病因，诱因和死亡原因，得具体分析。就拿这个病来说，发病原因是肿大病毒属虹彩病毒，但是具体是不是这个病毒引起的死亡，需要检测正常鱼和发病鱼，看看是否都带毒，还是只有发病的鱼带毒；检测刚发病的鱼和濒死的鱼，看看病毒的带毒量如何，另外同时还应该要做细菌分离，看看是不是有细菌感染，是原发的还是继发的，都应该检测。

作者: leikunnuy 时间: 2013-11-9 14:31

渔夫来啦发表于 2013-11-9 11:52
不是每一种虹彩病毒都有致病性的哦（5/15检出率）。何况发病的鱼不一定都带病毒，即便病毒携带也不一定发 ...

去年篮子鱼上面我们也是做了的，你可以看看相关病例，这个病毒感染引起的病理变化大致也差不多，都是脾、肾等造血器官出现大量的肿大细胞和坏死（有的轻，有的重），有关报道也讲了，虹彩病毒能引起60多种海、淡水鱼发病的。从杏陈店的反馈来看，死亡的中华乌塘鳢应该是这个病毒引起死亡的，他们开始按照肠炎和细菌病来处理，是没有效果的，后来通过消毒等相关处理，部分发病轻的，好了。

作者: 渔夫来啦 时间: 2013-11-9 18:15

leikunnuy 发表于 2013-11-9 14:25:04

诱因、病因、死亡原因，这三个都得分析，我们只是做了其中一块，就是病因，诱因和死亡原因，得具体分析。就拿这个病来说，发病原因是肿大病毒属虹彩病毒，但是具体是不是这个病毒引起的死亡，需要检测正常鱼和发病

15条鱼5条携带虹彩病毒，10条不携带病毒的鱼是没有发病的健康鱼吗？雷老师如何确定病因为虹彩病毒？

作者: 渔夫来啦 时间: 2013-11-9 18:19

leikunnuy 发表于 2013-11-9 14:31:28

去年篮子鱼上面我们也是做了的，你可以看看相关病例，这个病毒感染引起的病理变化大致也差不多，都是脾、肾等造血器官出现大量的肿大细胞和坏死（有的轻，有的重），有关报道也讲了，虹彩病毒能引起60多种海、淡

请问雷老师，被虹彩病毒感染之后用什么样的消毒剂可以控制病情呢？很多海水鱼虹彩病毒病很难治疗，望雷老师指点。

作者: tangsl 时间: 2013-11-9 20:04

渔夫来啦发表于 2013-11-9 18:19
请问雷老师，被虹彩病毒感染之后用什么样的消毒剂可以控制病情呢？很多海水鱼虹彩病毒病很难治疗，望雷老 ...

不要难为他了，他不是学水产的。

作者: 渔夫来啦 时间: 2013-11-10 07:32

tangsl 发表于 2013-11-9 20:04:58

不要难为他了，他不是学水产的。

唐老师，跪求真相～

作者: leikunnuy 时间: 2013-11-10 07:48

渔夫来啦发表于 2013-11-9 18:15
15条鱼5条携带虹彩病毒，10条不携带病毒的鱼是没有发病的健康鱼吗？雷老师如何确定病因为虹彩病毒？

你找裴店长给你说，另外就是让他发点图片给你，你看图片就知道了。

作者: leikunnuy 时间: 2013-11-10 07:57

渔夫来啦发表于 2013-11-10 07:32
唐老师，跪求真相～

你让我给你找找病原还行，让我给你分析其它的，你就真为难我了，我之前是学兽医的，是个杀猪匠，天天杀猪，水产和兽医不一样的，水产和环境紧密相关，对于这个病，我没有实地调查过，你问问杏陈店裴店长，让他给你分析，让他给你说他们是怎么防控的，还有最终的治疗效果。

作者: 老头鱼 时间: 2013-11-20 00:22
国内两广与海南，不管是海水还是淡水，虹彩病毒肿大属的95%以上都是属于ISKNV基因型，而不是真鲷虹彩病毒基因型，有时候单单衣壳蛋白序列还分不开这两个基因型，需要其它序列，如DNA聚合酶，跟准确的说，珠三角和海南不管是淡水的加州鲈、笋壳鱼还是海水的石斑鱼、美国红鱼、蓝子鱼、包公等，我们检测的基本都属于ISKNV.

作者: 老头鱼 时间: 2013-11-20 00:25
这两个基因型区别很小，而且真鲷虹彩病毒也比较好记和交流，但作为检测的专业人士，还是需要明白两者之间的区别。

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