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标题: 弧菌培养时,菌落颜色发生变化。 [打印本页]

作者: 丁玉龙    时间: 2018-9-19 17:06
标题: 弧菌培养时,菌落颜色发生变化。
弧菌培养时,培养时间过长时,菌落颜色会发生变化。有的黄色菌落会变成绿色,而有的绿色菌落则会变成黄色,这是为什么?
作者: 天天狸    时间: 2018-9-19 21:48
时间长了会变颜色,可能是产物发生变化了
作者: leikunnuy    时间: 2018-9-20 08:24
培养时间长了,弧菌的代谢产物,导致整个培养基的pH值发生了变化,菌落颜色就会发生变化。所以我们在做细菌培养,观察细菌的菌落特征的时候,要在规定的时间范围内观察,一般都是在24~48小时内观察,特殊的细菌,诺卡氏菌、鮰爱德华氏菌、杀鲑气单胞菌等由于受培养温度以及自身的生物学特性影响,在72小时内观察。此外,有些气单胞菌在高温时生长较快,12小时就可以观察了。综合来说,在进行细菌菌落形态观察,前期最好每隔12小时观察一次。
作者: leikunnuy    时间: 2018-9-20 08:28
举个简单的例子,链球菌,在脑心浸液培养皿上培养24小时,菌落是圆形、隆起、无色透明、针尖大小的小菌落,随着培养时间的增长,菌落颜色就会变成白色不透明的小菌落。但是关于链球菌菌落特征的描述,资料都是以前期的为准。如果我们以培养时间长了的菌落特征来进行细菌判断,就会导致错误的判断。
作者: 丁玉龙    时间: 2018-9-25 11:38
天天狸 发表于 2018-9-19 21:48
时间长了会变颜色,可能是产物发生变化了

是这么个说法,但不知为何变化的方向会截然相反,有何影响因素?
作者: 丁玉龙    时间: 2018-9-25 11:41
leikunnuy 发表于 2018-9-20 08:28
举个简单的例子,链球菌,在脑心浸液培养皿上培养24小时,菌落是圆形、隆起、无色透明、针尖大小的小菌落, ...

弧菌检测培养时间多久观测为宜?我看有的12个小时,有的16个小时,有的24个小时,哪个最佳?
作者: leikunnuy    时间: 2018-9-25 14:34
丁玉龙 发表于 2018-9-25 11:41
弧菌检测培养时间多久观测为宜?我看有的12个小时,有的16个小时,有的24个小时,哪个最佳?

主要得看看培养温度,建议培养12个小时候就开始观察,以前我做猪的细菌分离培养的时候,我老师就是要求我从12小时后,每隔6个小时观察一次,记录菌落形态。
作者: 丁玉龙    时间: 2018-9-25 14:51
leikunnuy 发表于 2018-9-25 14:34
主要得看看培养温度,建议培养12个小时候就开始观察,以前我做猪的细菌分离培养的时候,我老师就是要求我 ...

培养温度也有讲究,目前我见过24摄氏度,28摄氏度,30摄氏度,34摄氏度的,看都能培养的不错,真不知道哪个才是正确的。
作者: leikunnuy    时间: 2018-9-26 09:39
丁玉龙 发表于 2018-9-25 14:51
培养温度也有讲究,目前我见过24摄氏度,28摄氏度,30摄氏度,34摄氏度的,看都能培养的不错,真不知道哪 ...

水产动物细菌的培养温度一般都是28℃(特殊的除外,如诺卡氏菌、杀鲑气单胞菌等需要低温培养)。细菌都有最适生长温度,这个最适生长温度也是个范围,只要在这个最适生长温度范围内培养都没有问题的。
作者: leikunnuy    时间: 2018-9-26 09:42
丁玉龙 发表于 2018-9-25 14:51
培养温度也有讲究,目前我见过24摄氏度,28摄氏度,30摄氏度,34摄氏度的,看都能培养的不错,真不知道哪 ...

在做细菌分离培养的时候,可以根据临床症状,初步判断是何种细菌病,再查一下这种细菌的最适生长温度,然后在选择培养温度进行培养。
作者: 天天狸    时间: 2018-9-27 20:59
丁玉龙 发表于 2018-9-25 11:38
是这么个说法,但不知为何变化的方向会截然相反,有何影响因素?

颜色变化主要是与产酸有关,可能时间长了产酸少了颜色就变回去了
作者: 虫下    时间: 2018-9-27 21:34
leikunnuy 发表于 2018-9-20 08:28
举个简单的例子,链球菌,在脑心浸液培养皿上培养24小时,菌落是圆形、隆起、无色透明、针尖大小的小菌落, ...

所以不能放久,任何培养基都有其鉴别时效的
作者: leikunnuy    时间: 2018-9-28 08:56
虫下 发表于 2018-9-27 21:34
所以不能放久,任何培养基都有其鉴别时效的

尽量熟悉每种细菌的生物学特性,这样有利于细菌分离培养,有助于准确进行细菌病的诊断。
作者: 丁玉龙    时间: 2018-9-28 21:18
leikunnuy 发表于 2018-9-26 09:39
水产动物细菌的培养温度一般都是28℃(特殊的除外,如诺卡氏菌、杀鲑气单胞菌等需要低温培养)。细菌都有 ...

咱们研究所一室那边做弧菌培养,用的是多少度?培养时间多久?进行计数的。
作者: leikunnuy    时间: 2018-9-29 10:58
丁玉龙 发表于 2018-9-28 21:18
咱们研究所一室那边做弧菌培养,用的是多少度?培养时间多久?进行计数的。

弧菌培养是用的28℃,培养24小时观察结果。
作者: 丁玉龙    时间: 2018-10-9 08:52
leikunnuy 发表于 2018-9-29 10:58
弧菌培养是用的28℃,培养24小时观察结果。

嗯,28摄氏度,应该12-16个小时的时候就可以观测结果了,很明显了,可以节省一些时间。
作者: 丁玉龙    时间: 2018-10-11 08:44
天天狸 发表于 2018-9-19 21:48
时间长了会变颜色,可能是产物发生变化了

在TCBS琼脂平板上培养24h是绿色菌落,48h则变为黄色菌落,既不是副溶血性弧菌,也不是霍乱弧菌。

作者: 丁玉龙    时间: 2018-10-11 08:47
副溶血性弧菌不发酵蔗糖,菌落呈蓝绿色。
    霍乱弧菌发酵蔗糖产酸,菌落呈黄色。然后,这些有机酸,也被这种细菌利用,分解成二氧化碳挥发了,有机酸没有了,菌落就重新变成绿色的了。

  黄色菌落只要是利用培养基中的蔗糖产酸,菌落就是黄色的,像溶澡弧菌、河流弧菌、麦氏弧菌、等要本培养基上均为黄色菌落,并不是黄色菌落就是霍乱弧菌。
        另:霍乱弧菌一旦检出要立即送有关部门,普通实验室是不准保存的!!


     黑色:细菌分解含硫物质产生硫化氢同时与培养基中的含铁物质反应,从而产生黑色的菌落.
作者: 丁玉龙    时间: 2018-10-11 08:50
天天狸 发表于 2018-9-19 21:48
时间长了会变颜色,可能是产物发生变化了

该培养基中的牛胆粉有抑制其他革兰氏阳性菌的作用,与枸橼酸钠和硫代硫酸钠合用时,对大肠杆菌有明显抑制作用。同时枸橼酸钠和枸橼酸铁可使霍乱弧菌免受其他抑菌剂的作用,加之有营养丰富的酵母浸粉,霍乱弧菌又能利用蔗糖分解产酸,所以菌落较大,且呈黄色。大肠杆菌等杂菌菌落较小或不生长,故易识别。




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